產(chǎn)半纖維素酶芽孢桿菌的篩選鑒定、發(fā)酸工藝及飼用效果研究.pdf

1、傳統(tǒng)飼料中富含抗消化粘性甘露聚糖和木聚糖，而畜禽的消化酶系中不含甘露聚糖酶，動物自身木聚糖酶很難將木聚糖完全降解，因此對這類物質(zhì)的轉(zhuǎn)化利用需要添加外源酶，但直接添加酶制劑又存在成本較高的問題，采用添加產(chǎn)酶益生菌劑的方式簡便易行，可以達到提高飼料的利用率和降低養(yǎng)殖成本的目的。
　　 本研究采用剛果紅平板變色圈法進行產(chǎn)木聚糖酶芽孢桿菌和產(chǎn)甘露糖酶芽孢桿菌的篩選，通過液體發(fā)酵測定酶活力進行復(fù)篩，并進行動物胃腸道耐受性和安全性試驗，篩選

2、出能夠耐受動物胃腸道環(huán)境并且具有較高酶活力的安全性芽孢菌株。最終篩選到產(chǎn)木聚糖酶B-5菌株和產(chǎn)甘露聚糖酶NB-5菌株。其中B-5菌株和NB-5菌株在pH為2時仍保持較好的耐受性，存活率達到了90％左右，在人工腸液模擬環(huán)境中也都有很好的耐受性。
　　 通過形態(tài)特征、生理生化實驗和16SrDNA全序列分析，鑒定B-5菌株和NB-5菌株均為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，是國家農(nóng)業(yè)部允許的飼喂動物安全菌株，對兩菌株展

3、開拮抗和共存性試驗，證實菌株間不存在拮抗性，可以制成復(fù)合菌劑同時飼喂。
　　 對菌劑的生產(chǎn)工藝進行了研究。以菌株的芽孢形成率和芽孢數(shù)量為測定指標(biāo)，分別對兩菌株進行單因素和正交試驗，得出了兩菌株的最佳產(chǎn)芽孢條件。
　　 B-5菌株:玉米粉2％,酵母粉3％,MgSO4·7H2O0.3％,K2HPO40.01％,KH2PO40.02％，轉(zhuǎn)速200rpm，裝液量100/250mL，接種量6％，發(fā)酵時間96h。
　　 NB

4、-5菌株:玉米粉1％，酵母粉1％，CaCl20.1％，K2HPO40.01％，KH2PO40.02％，轉(zhuǎn)速200rpm，裝液量100/250mL，接種量4％，發(fā)酵時間48h，在此營養(yǎng)和培養(yǎng)條件下進行了兩菌株菌劑的制備，為菌株的菌劑生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。
　　 以河谷肉鴨為供試動物，考察了B-5菌株菌劑、NB-5菌株菌劑及二者復(fù)合菌劑的飼喂應(yīng)用效果。通過測定對照組和添加菌劑組肉鴨的生長性能、腸道菌群變化、腸道消化酶活力變化及糞便中常規(guī)營

5、養(yǎng)物質(zhì)的變化情況，探究菌劑促進肉鴨生長性能及提高飼料轉(zhuǎn)化率的機理。結(jié)果表明:添加菌劑對肉鴨的生長性能有顯著促進作用，日均增重較對照組均有不同程度提高，平均提高4.58％-7.85％，料重比均有不同程度降低，平均降低3.10％-7.41％;菌劑可對供試肉鴨腸道菌群的組成進行調(diào)整，試驗組腸道中有益菌群雙歧桿菌和乳酸桿菌均有不同程度提高，而致腹瀉大腸桿菌有害菌群數(shù)量降低;試驗組肉鴨腸道中纖維素酶活力、木聚糖酶活力和甘露聚糖酶活力均較對照組有所