游離脂肪酸、脂代謝相關(guān)細(xì)胞因子與代謝綜合征的關(guān)系.pdf

1、目的：探討代謝綜合征患者血清游離脂肪酸(FFAs)譜的變化及與其它糖脂代謝參數(shù)之間的關(guān)系。
　　 方法：用氣相色譜/質(zhì)譜(GC/MS)聯(lián)合分析法測(cè)定53例代謝綜合征、43例2型糖尿病患者及31例正常對(duì)照者血清游離脂肪酸譜。結(jié)果：(1)糖尿病組與正常組相比：不飽和脂肪酸UFA(C18：2、C18：1、C20：4、C22：6、C20：3)升高，其中C18：2、C18：1、C20：3差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)
　　 意義（P值均

2、。飽和脂肪酸(C16：0、C18：0)和SFA/TFA(飽和脂肪酸/總脂肪酸)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜O.O1)：UFA/TFA(不飽和脂肪酸/總脂肪酸)、PUFA/TFA(多不飽和脂肪酸/總脂肪酸)、PUFA/SFA(多不飽和脂肪酸/飽和脂肪酸)、n6/n3(n-6系列不飽和脂肪酸/n-3系列不飽和脂肪酸)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。(2)代謝綜合征患者C18：2、C18：1、C20：4、C22：6、C20：3升高，其

3、中C18：2、C18：1、C22：6、C20：3差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

4、義(P值均

5、.189，P　　 結(jié)論：代謝綜合征組、糖尿病組的不飽和脂肪酸、UFA/TFA和PUFA/SFA等升高，說(shuō)明FFAs組成成分發(fā)生了變化，存在游離脂肪酸代謝紊亂。糖尿病可能比不伴有糖尿病的代謝綜合征更易受到脂質(zhì)化損傷。血糖與UFA/TFA、PUFA/TFA、PUFA/SFA、n6/n3呈正相關(guān)，血糖與SFA/TFA呈負(fù)相關(guān)，提示UFA、特別是n6系可能在MS及糖尿病發(fā)生發(fā)展中起重要作用。
　　 目的：探討游離

6、脂肪酸(油酸，OA)誘導(dǎo)小鼠胰島p細(xì)胞系MIN6胰島素分泌功能的變化、基因表達(dá)譜的情況及評(píng)估潛在的保護(hù)因素N.乙酰半胱氨酸(NAC)對(duì)游離脂肪酸作用的影響。
　　 方法：以MIN6細(xì)胞為對(duì)象，分別用OA+BSA、NAC+BSA、OA+BSA+N_AC及BSA四組刺激72小時(shí)：(1)放射免疫法檢測(cè)培養(yǎng)液中胰島素及葡萄糖刺激下的胰島素分泌量及細(xì)胞總胰島素量。(2)提取RNA，并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，用寡核苷酸微陣列掃描基因表達(dá)譜，用分析

7、軟件分析基因表達(dá)譜的改變。(3)采用實(shí)時(shí)定量RT—PCR比較從基因表達(dá)譜挑選出的變化顯著的基因的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：(1)OA增加MIN6細(xì)胞基礎(chǔ)胰島素的分泌，但抑制了葡萄糖刺激F的胰島素分泌。NAC不能改善OA對(duì)基礎(chǔ)及葡萄糖刺激下的胰島素分泌的影響。(2)與對(duì)照BSA相比較，OA減少M(fèi)IN6細(xì)胞總胰島素含量約50％，加上NAC后，細(xì)胞總胰島素含量可明顯恢復(fù)。(3)微陣列結(jié)果：對(duì)總共12000個(gè)基因或已表達(dá)序列標(biāo)志(Expr

8、essed sequencetag，：ESTs)進(jìn)行分析，OA可降低約667個(gè)基因的表達(dá)；上調(diào)約265個(gè)基因的表達(dá)，NAC可顯著減少OA下調(diào)基因或ESTs的數(shù)量[從667±66至192±29(OA vs.OA+NAC，P<0.05)]。但OA上調(diào)基因或ESTs的數(shù)量沒(méi)有顯著性改變[從265±88至212士14(OA vs.OA+NAC，P=0.77)]。(4)從微陣列結(jié)果中分析中挑選出45個(gè)變化顯著的基因作進(jìn)一步的實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)，證

9、實(shí)其中16個(gè)基因表達(dá)變化>1.8倍，28個(gè)基因變化>1.2-1.3倍。將受OA調(diào)節(jié)的基因根據(jù)功能分類，涵蓋與脂肪代謝功能相關(guān)的基因占32％、與細(xì)胞生長(zhǎng)/分化及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因分別占13％和16％、與復(fù)制、蛋白聚集分泌、核小體裝配及細(xì)胞防御反應(yīng)相關(guān)基因占2-9％。NAC可逆轉(zhuǎn)大部分與細(xì)胞生長(zhǎng)/分化功能相關(guān)基因的表達(dá)，但對(duì)與代謝相關(guān)的基因無(wú)明顯逆轉(zhuǎn)作用。結(jié)論：(1)OA長(zhǎng)期培養(yǎng)胰島細(xì)胞可增加基礎(chǔ)胰島素分泌，抑制葡萄糖刺激下胰島素分泌，可能的

10、機(jī)制是導(dǎo)致了胰島p細(xì)胞功能受損?？寡趸瘎㎞AC并不能恢復(fù)OA對(duì)GSIS的影響，說(shuō)明OA的氧化應(yīng)激作用對(duì)葡萄糖刺激下胰島素分泌的脂毒性不是直接作用。(2)長(zhǎng)期暴露于游離脂肪酸可抑制胰島素的生物合成，導(dǎo)致胰島素含量減少和胰島素成熟受阻，且這種影響可被NAC完全逆轉(zhuǎn)。(3)OA可使與脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)顯著變化，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)與葡萄糖氧化、酵解相關(guān)基因的改變。(4)通過(guò)基因表達(dá)譜的檢測(cè)，提供了許多與p細(xì)胞脂毒性的機(jī)制可能相關(guān)的候選基因，為今后的進(jìn)一

11、步研究打下了基礎(chǔ)。
　　 目的：探討代謝綜合征患者的與脂代謝密切相關(guān)的血清脂聯(lián)素、視黃醇結(jié)合蛋白.4(RBP4)，血管生成素樣蛋白.3(Angptl3)水平的變化及其意義。
　　 方法：對(duì)111例代謝綜合征(MS)患者和152例健康對(duì)照，采用單克隆抗體雙夾心酶聯(lián)免疫法測(cè)定的血清脂聯(lián)素、視黃醇結(jié)合蛋白一4及血管生成素樣蛋白一3水平，分析血清脂聯(lián)素、視黃醇結(jié)合蛋白一4及血管生成素樣蛋白.3與脂代謝紊亂等MS相關(guān)組分的關(guān)系。<

12、br>　　 結(jié)果：(1)男性脂聯(lián)素水平明顯低于女性(P<0.001)，而RBP4水平明顯高于女性(P

13、正年齡、性別和BMI后，血清脂聯(lián)素與HDL—C、Angpt13水平顯著正相關(guān)(P<0.05)，與FPG、TG、FINS、HOMA—IR負(fù)相關(guān)(P

14、顯著正相關(guān)(P〈O.001)，但與FINS、HOMA-IR水平負(fù)相關(guān)關(guān)系不再顯著(Jp分別為O.118和0.086)。校正年齡和性別后，血清RBP4水平與BMI、WC、WHR、體脂含量、PBG、TG、TC、LDL—C、SBP、DBP、FINS、HOMA-IR顯著正相關(guān)(P<0.05)，與HDL-C水平顯著負(fù)相關(guān)(P=0.012)；在校正年齡、性別和BMI后，血清RBP4水平與PBG、TG、TC、LDL.C、SBP、DBP顯著正相關(guān)(P<

15、0.05)，與HDL.C水平顯著負(fù)相關(guān)(P=0.055)，而與FINS、HOMA-IR、體脂含量的相關(guān)關(guān)系消失。(3)用多元逐步回歸法，TG、Angpt13、性別、HOMA-IR是血清脂聯(lián)素的獨(dú)立決定因素。脂聯(lián)素是血清Angptl3的獨(dú)立決定因素。TG、性別、DBP是血清RBP4的獨(dú)立決定因素。(4)校正年齡、性別和BMI后，高TG組脂聯(lián)素水平明顯低于對(duì)照組[4.40(0.97—23.29)vs.6.67(1.12.22.27)ug/m

16、l，P=0.001]，低HDL.C組脂聯(lián)素水平明顯低于對(duì)照組[4.96(0.97.14.88、)VS.5.18(1.12-23.29)ug/ml，P=0.005]。高TG組RBP4水平明顯高于對(duì)照組(55.22±17.72 VS.45.21±17.72ug/ml，P<0.001)。校正年齡、性別和BMI后，高TG組RBP4水平仍高于對(duì)照組(F-9.549，P=0.002)。ANGPTL3水平在高TG組、低HDL-C組與對(duì)照組相比較無(wú)明顯

17、差別[分別為：(424.69±154.06 vs.421.92±138.16 ng/ml，P=0.878)、(428.46±134.06 vs.416.94±158.81 ng/ml，P=0.531)]。(5)非酒精性脂肪肝(NAFLD)組脂聯(lián)素水平明顯低于對(duì)照組(P　　 結(jié)論：(1)人血清脂聯(lián)素水平與血脂紊亂

18、等MS各相關(guān)組分呈負(fù)相關(guān)，NAFLD患者脂聯(lián)素水平明顯降低，提示血清脂聯(lián)素含量降低可能為MS進(jìn)展的原因之一。(2)Angpt13與血脂紊亂等MS組分無(wú)明顯關(guān)聯(lián)，與脂聯(lián)素呈獨(dú)立正相關(guān)，人體Angpt13對(duì)血脂的調(diào)節(jié)與動(dòng)物研究的結(jié)果不一致，Angpt13在人體和動(dòng)物體內(nèi)的差別表現(xiàn)及原因，仍有待進(jìn)一步研究。(3)RBP4與血脂、中心性肥胖、HOMA—IR、NAFLD等胰島素抵抗關(guān)聯(lián)的多個(gè)代謝參數(shù)關(guān)系密切，可能是引起脂代謝紊亂和胰島素抵抗的主要