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1、研究背景與目的: 輸精管結(jié)扎術(shù)是目前最有效和廣泛開(kāi)展的男性節(jié)育方法,常規(guī)輸精管結(jié)扎和近端開(kāi)放輸精管結(jié)扎是其兩種主要的手術(shù)方式。輸精管結(jié)扎對(duì)睪丸精子發(fā)生和附睪結(jié)構(gòu)的影響仍不完全清楚,而它可能影響輸精管吻合術(shù)后生育能力的恢復(fù)或輸精管結(jié)扎后進(jìn)行人工受精的成功率。我們前期的研究顯示,兔輸精管結(jié)扎損害了精子發(fā)生,最嚴(yán)重的損害發(fā)生在術(shù)后lO天所有輸精管結(jié)扎側(cè)的睪丸,術(shù)后6月和12月對(duì)約一半動(dòng)物的精子發(fā)生有顯著影響。但這種損害是由于輸精管的阻
2、塞還是手術(shù)創(chuàng)傷引起的并不清楚。本實(shí)驗(yàn)對(duì)比研究雙側(cè)常規(guī)輸精管結(jié)扎和雙側(cè)近端開(kāi)放輸精管結(jié)扎10天和3月對(duì)睪丸和附睪的組織學(xué)影響,以進(jìn)一步探討手術(shù)創(chuàng)傷是否影響結(jié)扎術(shù)后并發(fā)癥以及近端開(kāi)放輸精管結(jié)扎是否可緩解結(jié)扎術(shù)后并發(fā)癥。 方法: 1.正常雄性新西蘭大耳白兔(4~5月齡)50只,隨機(jī)分為4組:雙側(cè)常規(guī)輸精管結(jié)扎組(BCV)——暴露雙側(cè)睪丸和輸精管,切除一段輸精管并結(jié)扎兩側(cè)斷端;雙側(cè)近端開(kāi)放輸精管結(jié)扎組(BOEV)——暴露和切除輸
3、精管同BCV,附睪側(cè)輸精管斷端保持開(kāi)放,只結(jié)扎另一側(cè)輸精管;雙側(cè)對(duì)照手術(shù)組(BCO)——同BCV那樣暴露輸精管后,不切斷也不結(jié)扎輸精管;雙側(cè)假手術(shù)(BSO)——只作一皮下切口。BCO組6只動(dòng)物,其余每組13~15只動(dòng)物。 2.手術(shù)后10天4個(gè)組的動(dòng)物(每組6只)以及手術(shù)后3月BCV組、BOEV組和BSO組的剩余動(dòng)物,經(jīng)Bouin液灌注固定后取材。BSO組隨機(jī)取單側(cè)睪丸和附睪,其他組取雙側(cè)睪丸和附睪。 3.用羥乙基甲基丙烯
4、酸樹(shù)脂包埋睪丸及附睪的組織塊,切10μm厚的樹(shù)脂切片,用PAS和蘇木精(睪丸)或單獨(dú)用蘇木精(附睪)染色。 4.光鏡下定性觀察睪丸和附睪的結(jié)構(gòu)。 5.用體視學(xué)方法測(cè)量生精小管和附睪管的體積以及生精小管的直徑和長(zhǎng)度。 結(jié)果: 1.BSO組睪丸和附睪形態(tài)正常,與周?chē)M織無(wú)粘連。BCV、BOEV和BCO組的睪丸和附睪均與周?chē)M織有不同程度的粘連,常扭曲變形,有的明顯變小。 2.術(shù)后10天,觀察到精子發(fā)生
5、被明顯損害的睪丸數(shù)在各組分別為2/11(BCO組,即該組觀察的11個(gè)睪丸中有2個(gè)出現(xiàn)了精子發(fā)生的明顯損害)、4/12(BCV)、12/12(BOEV)和0/6(BSO),其中BOEV組的損害最嚴(yán)重。術(shù)后3月,觀察到精子發(fā)生被明顯損害的睪丸數(shù)在各組分別為9/14(BCV)、9/13(BOEV)和1/9(BSO)。3月BCV組比10天BCV組有更多的睪丸有精子發(fā)生損害,且損害更嚴(yán)重。與10天BOEV組相比,3月BOEV組精子發(fā)生的損害在4/
6、13的睪丸有所恢復(fù),而在9/13的睪丸沒(méi)有改善或有更嚴(yán)重的損害。 3.精子發(fā)生損害的主要特征是:生精細(xì)胞(尤其是生精上皮淺層或腔面的生精細(xì)胞)脫落、疏松,數(shù)量減少;生精小管直徑顯著變??;生精細(xì)胞退化和多核細(xì)胞形成。在術(shù)后10天,BSO、BCO、BCV和BOEV組的睪丸體積(cm3,mean±SEM)和生精小管直徑(μm,mean±SEM)分別是2.14±0.23、1.74±0.09、1.57±O.14、1.15±0.07和181
7、±10、186±6、169±8、130±4。在術(shù)后3月,BSO、BCV和BOEV組的睪丸體積和生精小管直徑分別是2.454±0.10、1.674±0.24、1.334±0.18和199±6、1584±10、151±11。 4.術(shù)后10天,BCV組的附睪形態(tài)定量參數(shù)無(wú)顯著性改變。但BOEV組的附睪頭部萎縮,附睪頭部體積和頭部小管體積顯著減少到BSO組的57.4%和36.6%。 5.術(shù)后3月,BCV組和BOEV組均出現(xiàn)附睪尾
8、部精子郁積和附睪管擴(kuò)張。BSO、BCV和BOEV組的附睪尾部體積(mm3,mean±SEM)和尾部附睪管體積(mm3,mean±SEM)分別是5574±30、8324±96、936±65和259±36、566±82、561±68。BCV組和BOEV組附睪頭部萎縮,附睪頭部和頭部小管體積顯著減少到BSO組的63.9%和67.9%。兩組均沒(méi)有附睪精子肉芽腫形成。 結(jié)論: 1.輸精管結(jié)扎后短期內(nèi)對(duì)精子發(fā)生的損害可能主要是手術(shù)創(chuàng)
9、傷和炎性刺激所致,而長(zhǎng)期結(jié)扎對(duì)精子發(fā)生的影響可能主要是輸精管結(jié)扎本身的作用。輸精管結(jié)扎對(duì)附睪的主要影響是附睪尾部精子郁積,附睪管擴(kuò)張。 2.開(kāi)放性結(jié)扎并未減輕輸精管結(jié)扎對(duì)精子發(fā)生的損害,也未減輕附睪的精子郁積,事實(shí)上開(kāi)放性結(jié)扎術(shù)后10天對(duì)精子發(fā)生的損害更大。這提示,開(kāi)放性結(jié)扎術(shù)后短期內(nèi)可能由于精子溢出引起的刺激——炎性刺激或免疫反應(yīng)而加重了對(duì)精子發(fā)生的影響,而以后可能由于輸精管開(kāi)放端封閉(由于周?chē)M織粘連或斷端自行愈合),其對(duì)精
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