廣西雞傳染性支氣管炎病毒分子流行病學的研究.pdf

1、雞傳染性支氣管炎(Infectious bronchitis，IB)是由冠狀病毒科、冠狀病毒屬的傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的一種急性、高度接觸性傳染病。IBV主要侵害雛雞的呼吸道、生殖系統(tǒng)及腎臟，引起產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋量和蛋的品質(zhì)下降，導致雞的生產(chǎn)性能降低。由于病毒自身基因組易發(fā)生點突變、基因缺失、插入及重組，導致病毒不斷產(chǎn)生變異，新的血清型和基因型不斷出現(xiàn)。由于不同血清型IBV之間僅有部分或完全沒有交叉保護作用，使得實際生產(chǎn)中免疫接種

2、失敗的現(xiàn)象不斷發(fā)生。盡管廣泛及頻繁地使用疫苗．免疫，但近年來廣西許多雞場仍發(fā)生IB，造成了較大的危害及經(jīng)濟損失。因此，了解和掌握目前養(yǎng)雞生產(chǎn)上IBV流行毒株的分子變化的特征就成為一項有效防控IB的前提工作。 從廣西主要養(yǎng)雞地區(qū)(包括南寧、玉林、柳州)疑患傳染性支氣管炎的發(fā)病雞群中采集病料，應(yīng)用雞胚尿囊腔接種的方法進行病毒分離和培養(yǎng)，對有病變的雞胚，取其尿囊液進行常規(guī)的細菌檢查，陰性者通過血凝試驗(HA)、致雞胚矮小化試驗、對新城

3、疫病毒增殖干擾的試驗及利用反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)進行檢測。結(jié)果共有20株分離物均具有IBV感染特征，無直接血凝性，毒株對NDV有明顯的干擾作用，病毒傳代物有明顯的致雞胚矮小化作用，用RT-PCR方法成功擴增到IBVSl基因高變區(qū)I(HVRI)。 為了解廣西IBV現(xiàn)場流行毒株的遺傳變異情況，對廣西1985～2007年間分離到的22株傳染性支氣管炎病毒(IBV)的Sl HVRI基因進行序列測定，并與發(fā)表的其它IB

4、V參考株及鴿子分離的冠狀病毒株的基因序列進行比較和分析。系統(tǒng)進化關(guān)系顯示這些毒株可分為5個基因群，其中有16個廣西分離株屬第Ⅰ群，它們與鴿子冠狀病毒分離株的氨基酸序列同源性較高，與Masschusetts(Mass)型疫苗株的同源性較低。有15個分離株在33～34位和34～35之間分別有4個和3個氨基酸殘基的插入，GX-NN6在33～34位和34～35位之間則均有4個氨基酸殘基的插入；GX-YLl、GX-NN2與常用的：Mass型疫苗株

5、的親緣關(guān)系最近，同屬于第Ⅱ群；GX-G、GX-XD與日本同一時期分離的毒株JP Mi．yazaki 89親緣關(guān)系最近，屬于第Ⅲ群；GX-YL6、GX-NN_7與歐洲毒株4/91親緣關(guān)系較近，屬于第Ⅴ群。本研究的結(jié)果表明廣西存在著多種類型IBV毒株的流行，毒株Sl基因HVRI堿基的突變或插入比較普遍，可導致其氨基酸序列的變化，絕大部分毒株與目前常用的Mass．型疫苗株的親緣關(guān)系較低。同一時期的分離株同源性較高，但缺乏明顯的地域性差異。選取

6、不同基因型的6株代表性毒株進行人工感染雞的致病性試驗，試驗的結(jié)果表明，6株廣西IBV代表性分離毒株均對雞有較強的致病力，發(fā)病率為60％～100％；GX-NN4、GX-NN6和GX-YL5可分別引起雞只30％、20％和60％的死亡。病理剖檢顯示毒株除引起嚴重呼吸道病變和腎病變外，還能引起消化系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)眾多組織器官的明顯病變，病變出現(xiàn)的先后順序為呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)。研究結(jié)果表明，分離到的IBV流行毒株(GX-NN4、