青蒿素類抗瘧藥代謝動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、青蒿素及其衍生物是含過(guò)氧基團(tuán)的非生物堿倍半萜內(nèi)酯，由于結(jié)構(gòu)中沒(méi)有特征的光譜特性，所以早期對(duì)該類藥物代謝及藥動(dòng)學(xué)的研究在一定程度上受到分析方法的限制，因而至今對(duì)其代謝機(jī)理、藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)、作用靶點(diǎn)的認(rèn)識(shí)尚不完全清晰，需要對(duì)其進(jìn)行更深入地研究。本論文采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法，考察了青蒿素及其衍生物的活性代謝物雙氫青蒿素單劑量和連續(xù)5天口服給藥后大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)特征，通過(guò)比較其動(dòng)力學(xué)參數(shù)，得出青蒿素類抗瘧藥的時(shí)間依賴性特征；采用肝微粒體法考察了

2、青蒿素、雙氫青蒿素對(duì)大鼠肝微粒體酶的誘導(dǎo)作用，初步得出青蒿素類抗瘧藥具有自身誘導(dǎo)代謝特征。 一、青蒿素在大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究 采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，建立青蒿素在大鼠血漿中的定量分析方法，并通過(guò)該分析方法考察青蒿素單劑量和連續(xù)5天口服給藥后大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)特征。用電噴霧離子化源，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(：MRM)方式進(jìn)行正離子檢測(cè)。用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z 300.4-209.4(青蒿素)和m/z 316.4-163

3、.4(內(nèi)標(biāo)，蒿甲醚)。該方法的線性范圍為1.0～200.0 ng.ml<'-1>，濃度定量下限為1.0 ng.ml<'-1>。通過(guò)所得血藥濃度一時(shí)間曲線，計(jì)算主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，單劑量及連續(xù)給藥5天后的T<,max>(h)均為1.20士0.274，C<,max>(ng-ml<'-1>)分別為84.24±21.25、18.03±10.21，t<,1/2>(h)分別為1.01±0.123、1.08±0.124，AUC<,0-t>(h·ng·ml

4、<'-1>)分別為125.68±36.92、39.62±20.12。該方法靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，生物樣品用量小，適用于青蒿素藥物動(dòng)力學(xué)研究。 二、雙氫青蒿素在大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究 采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，建立β-雙氫青蒿素在大鼠血漿中的定量分析方法，并通過(guò)該分析方法考察β-雙氫青蒿素單劑量和連續(xù)5天口服給藥后大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)特征。用電噴霧離子化源，以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方式進(jìn)行正離子檢測(cè)。用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m

5、/z 267-4.163.4(β-雙氫青蒿素)和m/z 300.4-209.4(內(nèi)標(biāo)，青蒿素)。該方法的線性范圍為0.2～100.0 ng.ml<'-1>，濃度定量下限為0.2 ng.ml<'-1>。通過(guò)所得血藥濃度一時(shí)間曲線，計(jì)算主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，單劑量及連續(xù)給藥5天后的T<'max>(h)分別為0.75±0.25、0.83±0.29，Cm艤(ng·ml<'-1>)分別為140.56±24.30、13.215±1.211，t<,1/2>

6、(h)分別為0.42±0.25、0.52土0.33，AUC<,0-t>(h.ng.ml<'-1>)分別為146.83±30.86、10.80±3.664。該方法靈敏度高，生物樣品用量小，適用于β-雙氫青蒿素的藥物動(dòng)力學(xué)研究。 三、青蒿素類抗瘧藥對(duì)大鼠肝微粒體酶誘導(dǎo)的初步研究 采用超速離心法制備肝微粒體，并初步考察青蒿素、雙氫青蒿素對(duì)大鼠肝微粒體酶的誘導(dǎo)作用。用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定肝微粒體蛋白濃度及細(xì)胞色素P450含量。