尋常型銀屑病患者血清鋅與SOD、IL-2及TNF-α相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究尋常型銀屑病患者各期(進(jìn)展期、穩(wěn)定期、消退期)與對(duì)照組血清Zn(鋅)的變化情況，Zn與PASI評(píng)分(銀屑病皮疹面積和嚴(yán)重程度評(píng)分法)的關(guān)系，Zn與SOD(超氧化物岐化酶)的關(guān)系，以及Zn與IL-2(白介素-2)及TNF-a(腫瘤壞死因子-a)的關(guān)系，來(lái)探討Zn和銀屑病的關(guān)系，從而進(jìn)一步探討銀屑病的病因和發(fā)病機(jī)制。 方法：選擇40例尋常型銀屑病患者和30例正常人分別作為觀察組和對(duì)照組。分別抽取銀屑病患者進(jìn)展期、

2、穩(wěn)定期、消退期和正常人上午8～9時(shí)空腹時(shí)的外周血和無(wú)名指血。 ①對(duì)銀屑病患者各期在每次抽血前分別行PASI評(píng)分。 ②用BH5100型原子吸收光譜儀利用Zn的特征性譜線(xiàn)光強(qiáng)大小，根據(jù)朗伯-比耳定律，檢測(cè)Zn的含量。先打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，調(diào)控參數(shù)，將其能量值設(shè)為100～110之間，預(yù)熱30分鐘，依次用“0”、“1”、“2”、“3”號(hào)液定標(biāo)，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，使其相關(guān)系數(shù)在0.999以上，依次測(cè)量各樣品，得出結(jié)果 ③用黃嘌呤

3、氧化酶法通過(guò)SOD對(duì)超氧陰離子自由基的專(zhuān)一性抑制作用，測(cè)出血清總SOD的活力。按照說(shuō)明書(shū)配好試劑一至六，測(cè)定管和對(duì)照管分別加入試劑-1.0ml，試劑二、三、四各0.1ml，測(cè)定管加入樣品0.03ml,對(duì)照管加入等量的蒸餾水，混勻，置于37℃恒溫水浴40分鐘，加入顯色劑2ml，室溫放置10分鐘，調(diào)整分光光度計(jì)于550nm處，用蒸餾水調(diào)零比色。 ④采用雙抗夾心ELISA法檢測(cè)IL-2。用抗人IL-2單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中

4、的IL-2與單抗結(jié)合，游離成分被洗去，加入生物素化的抗人IL-2抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素，生物素與親和素特異性結(jié)合?？谷薎L-2抗體與結(jié)合在單抗上的人IL-2結(jié)合形成免疫復(fù)合物，游離成分被洗去，加入顯色劑，若反應(yīng)孔有IL-2，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑顯藍(lán)色，加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值，IL-2濃度與OD值成正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本的IL-2濃度。 ⑤TNF-a的檢測(cè)同IL-2。 結(jié)果：

5、 ①銀屑病患者在各期中血清Zn較正常人顯著降低，各組間有顯著性差異(F=108.35，P<0.01)，隨著銀屑病患者病情的好轉(zhuǎn)血清Zn有逐漸降低的趨勢(shì)。其血清Zn關(guān)系為：健康人(137.26±13.47μmol/l)>進(jìn)展期(116.91±16.66μmol/l)>穩(wěn)定期(97.31±9.17μmol/l)>消退期(88.54±7.93μmol/l)。銀屑病患者在各期中血清Zn與PASI評(píng)分呈正相關(guān)(各期相關(guān)系數(shù)R=0.641、0.7

6、49、0.717，P<0.01)，隨著PASI評(píng)分的降低Zn逐漸降低。 ②銀屑病患者存在著SOD的紊亂，在病程各期中SOD較正常人顯著降低，各組間有顯著性差異(F=85.53，P<0.01)，銀屑病患者在病情的恢復(fù)過(guò)程中SOD逐漸上升，但仍低于正常。其血清SOD關(guān)系為：進(jìn)展期(42.40±5.46 U/ml)<穩(wěn)定期(49.97±7.08 U/ml)<消退期(59.83±7.90 U/ml)<對(duì)照組(72.98±12.68U/m

7、l)。銀屑病患者在各期中SOD與PASI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(各期相關(guān)系數(shù)分別為：R=-0.815、-0.834、-0.730，P<0.01)，隨著PASI評(píng)分的逐漸降低，SOD逐漸上升，即隨著PASI評(píng)分的降低，SOD逐漸恢復(fù)正常。銀屑病患者在各期中Zn與SOD呈負(fù)相關(guān)(各期相關(guān)系數(shù)分別為：R=-0.443、-0.710、-0.604，P<0.01)，即隨著血清Zn的逐漸降低，SOD反而上升。而在正常人血清Zn與SOD呈正相關(guān)(R=0.534

8、，P<0.01)。 ③銀屑病患者在各期中IL-2較正常人顯著升高，各組間有顯著性差異(F=133.65，P<0.01)，隨著病情的恢復(fù)，IL-2逐漸恢復(fù)正常，但仍高于對(duì)照組。各期IL-2關(guān)系為：進(jìn)展期(44.16±6.44pg/ml)>穩(wěn)定期(34.77±6.14 pg/ml)>消退期(26.31±3.46 pg/ml)>對(duì)照組(21.75±3.32 pg/ml)。銀屑病患者在各期中IL-2與PASI評(píng)分呈正相關(guān)(各期相關(guān)系數(shù)為

9、：R=0.779、0.872、0.818，P<0.01)，隨著PASI評(píng)分的逐漸降低(銀屑病病情的好轉(zhuǎn))，IL-2逐漸降低。對(duì)照組和銀屑病患者在各期中Zn與IL-2均呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為：R=0.661，0.542、0.567、0.554，P<0.01)，隨著血清Zn的逐漸降低，IL-2逐漸降低。 ④銀屑病患者在各期中TNF-a較正常人顯著升高，各組間有顯著性差異(F=98.98,P<0.01)，隨著病情的恢復(fù)，TNF-a逐

10、漸降低，但仍高于對(duì)照組。各期TNF-a關(guān)系為：進(jìn)展期(25.65±4.54pg/ml)>穩(wěn)定期(20.51±3.12pg/ml)>消退期(16.49±1.90 pg/ml)>對(duì)照組(14.09±1.26 pg/ml)。銀屑病患者在各期中TNF-a與PASI評(píng)分呈正相關(guān)(各期相關(guān)系數(shù)R=0.779、0.845、0.788,P<0.01．)，隨著PASI評(píng)分的逐漸降低，TNF-a逐漸降低。對(duì)照組和銀屑病患者在各期中Zn與TNF-a評(píng)分均呈正

11、相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為：R=0.724，0.539、0.722、0.617,P<0.01)，隨著血清Zn的逐漸降低，TNF-a逐漸降低。 結(jié)論： ①銀屑病患者在病程中各期血清Zn呈進(jìn)行性下降，血清Zn均較正常人明顯降低，各組間有顯著性差異(P<0.01)。其血清Zn關(guān)系為：對(duì)照組>進(jìn)展期>穩(wěn)定期>消退期。銀屑病患者在病程的各期中血清Zn與PASI評(píng)分呈正相關(guān)。提示Zn可能通過(guò)多種途徑參與銀屑病的病理生理過(guò)程；銀屑病患者在病

12、程的各期中PASI評(píng)分越高，消耗的Zn就越多，Zn降低就更明顯。 ②銀屑病患者在病程的各期中SOD逐漸上升，但均較正常人顯著降低，各組間有顯著性差異(P<0.01)。其血清SOD值關(guān)系為：進(jìn)展期<穩(wěn)定期<消退期<對(duì)照組。銀屑病患者血清Zn與SOD呈負(fù)相關(guān)，但在對(duì)照組Zn與SOD呈正相關(guān)(P<0.01)。提示銀屑病患者存在著SOD的紊亂，隨著病情的恢復(fù)，SOD逐漸升高；缺Zn是銀屑病患者SOD降低的原因之一，但不是主要原因，銀屑病