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文檔簡介
1、目的:探討胃泌素(Gastin)和骨橋蛋白((osteopontin,OPN))在胃癌組織中表達的相互關系及胃泌素對胃癌細胞增殖和OPN表達的影響。
方法:取正常胃黏膜(normal gastric mucosa,NGM)、不典型增生(dimethyl sulfoxide,Dys)及胃癌組織(gastric cancer,GC)各20例,采用SP免疫組化法檢測各組織中Gastin、OPN蛋白的表達變化。培養(yǎng)人胃癌細胞株MK
2、N45后按藥物干預分組:胃泌素(Gastin)組,培養(yǎng)液中Gastin終濃度為10-8mol/L;丙谷胺(PGL)組,培養(yǎng)液中PGL終濃度為10-2mol/L;胃泌素+丙谷胺組,培養(yǎng)液中Gastin終濃度為10-8mol/L、PGL終濃度為10-2mol/L;以不加藥培養(yǎng)液為對照組。噻唑藍(MTT)比色法觀察細胞增殖活力改變,熒光定量PCR(RT-PCR)及免疫組化法測定胃泌素組(培養(yǎng)液中Gastin終濃度為10-8mol/L),丙谷胺
3、組(PGL終濃度為10-2mol/L),聯(lián)合用藥組(Gastin終濃度為10-8mol/L、PGL終濃度為10-2mol/L)及不加藥對照組中OPN蛋白的表達變化。
結果:免疫組化結果顯示:Gastin的表達在胃癌組和不典型增生組均高于正常組,差異存在統(tǒng)計學意義(p<0.05),胃癌組高于不典型增生組(p<0.05);OPN的表達在胃癌組和不典型增生組均高于正常組(p<0.05),胃癌組高于不典型增生組(p<0.05)。經
4、Spearman等級相關分析結果顯示:胃泌素與OPN表達呈正相關(r=0.483,p<0.05)。OPN表達與胃癌分期、浸潤深度及有無遠處轉移有關(p<0.05),隨胃癌的進展和浸潤深度表達增多(p<0.05),與分化程度、性別、年齡無關。MTT結果顯示:Gastin在10-8mol/L時可促進MKN45細胞增殖(p<0.05);PGL在10-2mol/L時可抑制MKN45細胞增殖(p<0.05);Gastin+PGL組中,PGL可抑制
5、Gastin對胃癌細胞株MKN45的促增殖作用(p<0.05)。RT-PCR和細胞組化結果顯示:胃癌細胞株MKN45中有OPN蛋白的表達。在Gastin組中OPN蛋白表達增強(p<0.05);PGL組中OPN蛋白表達減弱;Gastin+PGL組中,PGL可抑制Gastin誘導的OPN蛋白表達上調(p<0.05)。
結論:OPN與Gastin在胃癌組織中均表達增加,OPN表達與Gas表達呈正相關關系。Gastin可誘導人胃癌
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