Rab28在高血壓血管重建中的作用及其相關(guān)分子機(jī)制.pdf

1、周期性張應(yīng)變?cè)谘苤亟ㄕ{(diào)控中發(fā)揮重要作用,異常增高的張應(yīng)變是高血壓等相關(guān)血管疾病的重要誘因。在組成血管的成分細(xì)胞中,血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)主要承載周向張應(yīng)變的作用。因此研究不同張應(yīng)變狀態(tài)下VSMCs功能的變化,對(duì)于深入了解心血管疾病血管重建發(fā)病機(jī)制具有重要的理論和臨床意義。
　　實(shí)驗(yàn)室前期系列研究結(jié)果表明,Rab28是一種力學(xué)敏感分子,其在血管組織和細(xì)胞中的表達(dá)受到切應(yīng)力及張應(yīng)變的調(diào)控;同時(shí)發(fā)現(xiàn)Rab28與轉(zhuǎn)錄因子NF-kB

2、、FOXO4在ECs中具有共定位現(xiàn)象,提示Rab28可能協(xié)助這些分子的核漿運(yùn)輸過(guò)程。然而,Rab28在高張應(yīng)變誘導(dǎo)血管重建過(guò)程中的作用目前仍不清楚。
　　本研究首先應(yīng)用高血壓模型大鼠,檢測(cè)在體條件下血管組織Rab28、FOXO4、FOXO1以及phospho-FOXO1的表達(dá)與分布情況,并檢測(cè)反應(yīng)VSMCs表型的分化指標(biāo)蛋白a-actin、S M22 a、calponin的表達(dá)。為了探討異常增高的張應(yīng)變?cè)诟哐獕貉苤亟ㄖ械淖饔?我

3、們應(yīng)用FX-4000T體外周期性張應(yīng)變加載系統(tǒng),分別對(duì)VSMCs施加5％的生理性張應(yīng)變和15%的高血壓病理性張應(yīng)變,以0%張應(yīng)變作為靜止對(duì)照,頻率均為1.25 Hz,檢測(cè)Rab28、FOXO4、FOXO1、phospho-FOXO1以及VSMCs的分化與增殖。應(yīng)用RNAi技術(shù)特異性抑制VSMCs的FOXO1表達(dá),探討FOXO1及其磷酸化在VSMCs的增殖、分化中的功能及分子調(diào)控機(jī)制。
　　結(jié)果顯示:(1)腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)后2w和4w

4、,高血壓模型大鼠頸總動(dòng)脈收縮壓較假手術(shù)對(duì)照組明顯升高,模型構(gòu)建成功;(2)與假手術(shù)組比較,高血壓模型大鼠胸主動(dòng)脈組織中Rab28、F O X O4、F O X O1及phospho-FOXO1表達(dá)明顯上升,同時(shí)分化指標(biāo)分子的表達(dá)升高;(3)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明,與0%靜止組和5%張應(yīng)變組相比,牽拉24 h后15%高張應(yīng)變促進(jìn)Rab28、F O X O1及phospho-FOXOl表達(dá),但對(duì)FOXO4表達(dá)無(wú)顯著性影響,同時(shí)高張應(yīng)變促進(jìn)VSMC

5、s增殖,抑制分化;(4) RNAi抑制FOXOl后,phospho-FOXOl表達(dá)水平明顯降低,VSMCs增殖和分化均降低;(5)細(xì)胞免疫熒光染色顯示,當(dāng)靜止、饑餓狀態(tài)下,VSMCs內(nèi)Rab28主要分布在細(xì)胞漿中,血清刺激后,Rab28則大部分都分布在細(xì)胞核中,表明刺激誘導(dǎo)的Rab28在V S M C s中的核漿轉(zhuǎn)位可能與其功能相關(guān)。
　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,高血壓病理狀態(tài)下,異常增高的周向張應(yīng)變可能通過(guò)誘導(dǎo)Rab28、FOXO1及p