MMP-2、MMP-9和TIMP-1在子宮腺肌病子宮內(nèi)膜-肌層界面的表達(dá)及意義.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:探討子宮腺肌病患者在位子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜.肌層界面(endometrial-myometrial interface,以下簡(jiǎn)稱EMI)處基質(zhì)金屬蛋白酶.2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶.9(MMP-9)及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物-1(TIMP-1)的表達(dá)及其生物學(xué)意義。 方法:收集因子宮腺肌病行子宮切除的40例子宮內(nèi)膜(含部分肌層)作為研究組,因子宮肌瘤(無(wú)子宮內(nèi)膜病變)行子宮切除的40例子宮內(nèi)膜(含部分肌層)的標(biāo)本作為

2、對(duì)照組。對(duì)于兩種疾病同時(shí)存在者不納入研究,患者術(shù)前半年內(nèi)均未用過(guò)甾體激素類藥物。標(biāo)本經(jīng)常規(guī)10%福爾馬林液固定,石蠟包埋,制成蠟塊,行HE染色,經(jīng)鏡下觀察每種疾病的子宮內(nèi)膜是正常的。所有蠟塊行5μm連續(xù)切片。裝片后脫蠟至水,切片經(jīng)高壓抗原熱修復(fù)后,采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白.過(guò)氧化物酶連接法(SP三步法)分別進(jìn)行染色,進(jìn)行免疫組化染色前,先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),確定各抗體的最佳稀釋度(三種抗體均為1:80)、最佳孵育溫度和時(shí)間。顯微鏡下觀察各

3、組切片中EMI(包括基底層和肌層連接帶)內(nèi)膜腺體和遠(yuǎn)離肌層的功能層(以下簡(jiǎn)稱遠(yuǎn)肌層)內(nèi)膜腺體中MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表達(dá),陽(yáng)性染色為細(xì)胞漿中出現(xiàn)淺黃色、棕黃色或棕褐色顆粒,根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分率及顯色深淺,將結(jié)果分為陰性(一)、弱陽(yáng)性(+)、中度陽(yáng)性(++)、強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。分別記錄MMP-2、MMP-9及TIMP-1的染色強(qiáng)度,比較各因子在EMI處(基底層和肌層連接帶)的腺體和遠(yuǎn)肌層腺體的表達(dá)有無(wú)差異。同時(shí)觀察比較兩組E

4、MI肌層中腺體的數(shù)量:每張片子隨機(jī)觀察不同的四個(gè)低倍鏡視野的最寬處,記錄EMI肌層中腺體的數(shù)量,取其平均值,進(jìn)一步比較同一期別研究組與對(duì)照組有無(wú)差異。應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行x<'2>檢驗(yàn),艙驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: 1.EMI顯示子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)直接與子宮肌層相連,二者之間缺乏粘膜下層。在對(duì)照組中,EMI多為平滑的或呈鋸齒狀結(jié)構(gòu),在腺肌病組中,EMI多表現(xiàn)非常不規(guī)則形狀。腺肌病組EMI肌層內(nèi)

5、腺體的數(shù)量明顯大于對(duì)照組,兩者比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.MMP-2、MMP-9和TIMP-1三種蛋白的陽(yáng)性表達(dá)產(chǎn)物均定位于子宮內(nèi)膜腺上皮的細(xì)胞漿,少量表達(dá)于間質(zhì)細(xì)胞胞漿,呈淡黃色、棕黃色、棕褐色等不同強(qiáng)度染色,MMP-2和MMP-9呈現(xiàn)相似的表達(dá)強(qiáng)度。在子宮腺肌病組和對(duì)照組中,分泌期MMP-2、MMP-9的總體(EMI和遠(yuǎn)肌層之和)表達(dá)強(qiáng)度顯著高于增生期(P<0.05)。在兩組中TIMP-1的表達(dá)增生期與分泌

6、期比較差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 3.腺肌病組增生期和分泌期MMP-2、MMP-9的表達(dá)強(qiáng)度EMI處顯著高于遠(yuǎn)肌層(P<0.05)。EMI處MMP-2、MMP-9的表達(dá)增生期與分泌期比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.對(duì)照組中增生期EMI處MMP-2、MMP-9的表達(dá)強(qiáng)度高于遠(yuǎn)肌層(P<0.05),分泌期二者的表達(dá)在EMI略高于遠(yuǎn)肌層,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。MMP-2、MMP-9在增生期E

7、MI的表達(dá)與分泌期EMI的表達(dá)比較也無(wú)差異。 5.無(wú)論增生期還是分泌期,EMI處MMP-2、MMP-9表達(dá),腺肌病組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。 6.EMI處TIMP-1在增生期和分泌期的表達(dá),腺肌病組明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。TIMP-1在EMI和遠(yuǎn)肌層的表達(dá)比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。 7.EMI處MMP-2/TIMP-1與MMP-9/TIMP-1兩個(gè)比值,腺肌病組明顯高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。遠(yuǎn)肌層處MMP-2/TIMP-1與MMP-9/TIMP-1兩個(gè)比值,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論: 1.子宮腺肌病EMI表現(xiàn)為嚴(yán)重的不規(guī)則,EMI肌層中腺體多于對(duì)照組,可見(jiàn)多個(gè)生長(zhǎng)性位點(diǎn),推測(cè)該區(qū)域的結(jié)構(gòu)和功能改變可能與子宮腺肌病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。 2.子宮腺肌病組EMI處的內(nèi)膜腺體中MMP-2、MMP-9的表達(dá)顯著高于對(duì)照組,而TIMP-1的表達(dá)顯著低于對(duì)照組,這種表達(dá)形式可

9、使子宮內(nèi)膜的侵蝕能力增強(qiáng),降解包括基底膜在內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì),為腺肌病異位病灶的形成提供條件,可能參與子宮腺肌病的發(fā)生和發(fā)展。 3.分泌期MMP-2、MMP-9的總體表達(dá)強(qiáng)度顯著高于增生期,呈周期性變化,說(shuō)明此蛋白水解酶在子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)化、內(nèi)膜崩潰和經(jīng)期出血等方面發(fā)揮作用,其分泌可能受雌、孕激素的影響。 4.MMP-2/TIMP-1與MMP-9/TIMP-1這兩個(gè)比值在腺肌病組EMI處平衡失調(diào)可能在子宮腺肌病的發(fā)病中發(fā)揮重要作用

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