小柴胡湯及其成分的肝毒性體外研究.pdf

1、小柴胡湯在臨床上的肝臟毒副作用近年來受到越來越多的關(guān)注,但其致肝損傷的動物體內(nèi)實驗報道與人體臨床報道的結(jié)果并不相符,對于小柴胡湯是否具有肝毒性尚無充足的實驗證據(jù)。 本課題首次采用不同配伍組方的階梯式篩選方法,對小柴胡湯復(fù)方、配伍減方、單味藥材及其成分作用于體外人肝癌細(xì)胞進(jìn)行毒性的初步篩選,并采用正常人肝細(xì)胞進(jìn)行毒性驗證,以明確小柴胡湯是否具有肝細(xì)胞毒性及其毒性來源。結(jié)果顯示小柴胡湯水煎液具有肝細(xì)胞毒性；小柴胡湯中起主要毒性作用的

2、藥材為黃芩；柴胡本身無毒,但可能與黃芩協(xié)同作用并增強(qiáng)黃芩的毒性；半夏可減輕黃芩和柴胡的毒性作用。人肝癌細(xì)胞和正常人肝細(xì)胞的細(xì)胞活性檢測結(jié)果吻合,提示采用人肝癌細(xì)胞株進(jìn)行的肝細(xì)胞活性檢測可能為一種良好的肝細(xì)胞毒性藥物初步篩選模型,可以對大量的候選藥物進(jìn)行快速、簡便、可靠的肝細(xì)胞毒性篩選。 本課題針對小柴胡湯主要毒性藥材黃芩的兩個主要成分--黃芩苷和漢黃芩素,進(jìn)行了人肝細(xì)胞體外毒性檢測。結(jié)果顯示黃芩苷對人肝細(xì)胞有一定的毒性,但其毒性

3、貢獻(xiàn)并不足以反映黃芩或小柴胡湯整體的肝細(xì)胞毒性,漢黃芩素的各濃度組對肝細(xì)胞均無顯著毒性作用。 本課題引進(jìn)了細(xì)胞色素P450還原酶(CPR)組織特異性基因敲除(knockout)小鼠模型,利用此模型的肝微粒體體外孵育實驗,對黃芩苷的代謝酶系進(jìn)行了初步研究。結(jié)果顯示黃芩苷可通過野生型和CPR基因敲除小鼠肝微粒體代謝,由于本實驗中的CPR基因敲除小鼠肝微粒體不具備細(xì)胞色素P450的代謝功能,因此說明黃芩苷并不經(jīng)過肝臟微粒體細(xì)胞色素P4