Cks2在卵巢上皮性癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:
　　卵巢上皮性腫瘤是一類(lèi)臨床表現(xiàn)多樣化的腫瘤，其部分病變比較局限且分化良好，但部分病變發(fā)生廣泛組織浸潤(rùn)且預(yù)后極差，以早期診斷缺乏有效依據(jù)，病情發(fā)展迅速，后期治療難度大為特點(diǎn)。卵巢上皮性癌由于缺乏高效早期診斷模式，大部分患者確診時(shí)已屬晚期，因此成為婦科腫瘤中致死率最高的腫瘤。目前卵巢癌的治療方法以手術(shù)、化療為主，但是目前化療失敗引起患者較高的腫瘤復(fù)發(fā)率成為其治療的主要阻礙，從而更加深入地了解卵巢癌的分子學(xué)發(fā)病機(jī)制，將最終有助

2、于我們?cè)谠缙谠\斷上找到新的重要分子標(biāo)記物，同時(shí)也將促進(jìn)個(gè)體化分子靶向治療的發(fā)展應(yīng)用。
　　細(xì)胞周期依賴性激酶亞基蛋白家族(Cks)最初發(fā)現(xiàn)于分裂酵母中，包括Cks1與Cks2兩種結(jié)構(gòu)上充分保守的大小約9-18kDa的同源蛋白分子，該蛋白最初被發(fā)現(xiàn)能夠抑制有缺陷的周期依賴激酶(CDKs)的等位基因。Cks在哺乳動(dòng)物中普遍表達(dá)，也存在于部分脊椎動(dòng)物中，過(guò)去的傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為Cks能夠直接與CDK/cyclin蛋白復(fù)合物結(jié)合，而單純發(fā)揮抑制

3、或激活作用，但是現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)Cks2更傾向于在調(diào)節(jié)CDK功能中發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)的適應(yīng)性功能。
　　雖然在過(guò)去幾十年中Cks2在一些常見(jiàn)腫瘤組織中的過(guò)表達(dá)狀態(tài)一直被認(rèn)為是其扮演原癌基因角色的原因，但是Cks2的具體作用機(jī)制卻很少被人證實(shí)。迄今為止，尚未有明確研究資料證明Cks2在卵巢上皮性癌組織中是否存在異常紊亂表達(dá)，以及在卵巢上皮性癌的發(fā)生發(fā)展中是否存在促進(jìn)作用。本文旨在回顧性研究卵巢癌患者病理組織中Cks2的水平，比較不同病理類(lèi)型上

4、皮性卵巢癌與正常組織中Cks2表達(dá)差異，進(jìn)一步分析Cks2與卵巢漿液性癌的臨床特征是否存在關(guān)聯(lián)，最后探究其對(duì)腫瘤的作用與P53之間的關(guān)系。從而為卵巢上皮性癌早期診斷與分子靶向治療提供新的思路。
　　方法:
　　(1)測(cè)定卵巢上皮性癌患者癌組織與正常輸卵管傘端上皮及正常卵巢上皮組織中Cks2的表達(dá)水平:應(yīng)用Primer premier5.0軟件設(shè)計(jì)特異性引物，RT-PCR技術(shù)檢測(cè)Cks2的mRNA水平，通過(guò)特異Cks2抗體，運(yùn)

5、用western-blot檢測(cè)Cks2的蛋白水平。
　　(2)通過(guò)免疫組化技術(shù)運(yùn)用SP三步法檢測(cè)Cks2在卵巢漿液性癌中的表達(dá)水平，并結(jié)合臨床情況及隨訪結(jié)果，應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，進(jìn)行Spearman相關(guān)分析及生存分析。
　　(3)通過(guò)免疫組化技術(shù)運(yùn)用SP三步法檢測(cè)Cks2、P53、Cyclin E在卵巢漿液性癌中的表達(dá)情況，并進(jìn)行應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，進(jìn)行kappa一致性檢驗(yàn)。
　　結(jié)

6、果:
　　(1)Cks2在卵巢漿液性癌組織中的mRNA水平高于非漿液性癌組織，明顯高于正常輸卵管傘端上皮組織以及正常卵巢上皮組織;Cks2在卵巢漿液性癌組織中蛋白表達(dá)水平明顯高于正常輸卵管傘端上皮組織。
　　(2)Cks2在卵巢漿液性癌組織中高表達(dá)的比例最高(62.7％)，在卵巢子宮內(nèi)膜樣癌中高表達(dá)比例稍低(52.3％)，在卵巢粘液性癌中Cks2高表達(dá)者占41.7％，在卵巢透明細(xì)胞癌中Cks2高表達(dá)者比例最低(8.3％)。C

7、ks2在正常輸卵管傘端上皮中主要表達(dá)于分泌細(xì)胞，且陽(yáng)性率低于10％-30％。
　　(3)Cks2與卵巢漿液性癌臨床分期相關(guān)(P＜0.05)，與腫瘤患者腹水量、是否存在宮旁浸潤(rùn)、以及術(shù)后腫瘤殘余范圍相關(guān)，作K-M生存分析顯示低水平Cks2患者與高水平Cks2患者生存時(shí)間相比明顯延長(zhǎng)(P＜0.01)。
　　(4)P53與CCNE1的kappa系數(shù)為0.22(P＜0.01)、Cks2與CCNE1的kappa系數(shù)為0.17(P＜0.

8、01)，P53與Cks2綜合起來(lái)與CCNE1的kappa系數(shù)為0.459(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　(1)卵巢上皮性癌中Cks2存在明顯過(guò)表達(dá)，其中漿液性癌與子宮內(nèi)膜樣癌中過(guò)表達(dá)最為明顯，存在組織差異性表達(dá)。
　　(2)Cks2的升高與卵巢漿液性癌的臨床分期等因素相關(guān)，能夠作為患者預(yù)后預(yù)測(cè)依據(jù)。Cks2表達(dá)水平高的卵巢漿液性患者其生存時(shí)間較短。
　　(3)Cks2在卵巢漿液性癌中過(guò)表達(dá)與P53及CCNE1