Cks2在卵巢上皮性癌中的表達及臨床意義.pdf

1、目的:
　　卵巢上皮性腫瘤是一類臨床表現(xiàn)多樣化的腫瘤，其部分病變比較局限且分化良好，但部分病變發(fā)生廣泛組織浸潤且預(yù)后極差，以早期診斷缺乏有效依據(jù)，病情發(fā)展迅速，后期治療難度大為特點。卵巢上皮性癌由于缺乏高效早期診斷模式，大部分患者確診時已屬晚期，因此成為婦科腫瘤中致死率最高的腫瘤。目前卵巢癌的治療方法以手術(shù)、化療為主，但是目前化療失敗引起患者較高的腫瘤復(fù)發(fā)率成為其治療的主要阻礙，從而更加深入地了解卵巢癌的分子學(xué)發(fā)病機制，將最終有助

2、于我們在早期診斷上找到新的重要分子標記物，同時也將促進個體化分子靶向治療的發(fā)展應(yīng)用。
　　細胞周期依賴性激酶亞基蛋白家族(Cks)最初發(fā)現(xiàn)于分裂酵母中，包括Cks1與Cks2兩種結(jié)構(gòu)上充分保守的大小約9-18kDa的同源蛋白分子，該蛋白最初被發(fā)現(xiàn)能夠抑制有缺陷的周期依賴激酶(CDKs)的等位基因。Cks在哺乳動物中普遍表達，也存在于部分脊椎動物中，過去的傳統(tǒng)觀點認為Cks能夠直接與CDK/cyclin蛋白復(fù)合物結(jié)合，而單純發(fā)揮抑制

3、或激活作用，但是現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)Cks2更傾向于在調(diào)節(jié)CDK功能中發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)的適應(yīng)性功能。
　　雖然在過去幾十年中Cks2在一些常見腫瘤組織中的過表達狀態(tài)一直被認為是其扮演原癌基因角色的原因，但是Cks2的具體作用機制卻很少被人證實。迄今為止，尚未有明確研究資料證明Cks2在卵巢上皮性癌組織中是否存在異常紊亂表達，以及在卵巢上皮性癌的發(fā)生發(fā)展中是否存在促進作用。本文旨在回顧性研究卵巢癌患者病理組織中Cks2的水平，比較不同病理類型上

4、皮性卵巢癌與正常組織中Cks2表達差異，進一步分析Cks2與卵巢漿液性癌的臨床特征是否存在關(guān)聯(lián)，最后探究其對腫瘤的作用與P53之間的關(guān)系。從而為卵巢上皮性癌早期診斷與分子靶向治療提供新的思路。
　　方法:
　　(1)測定卵巢上皮性癌患者癌組織與正常輸卵管傘端上皮及正常卵巢上皮組織中Cks2的表達水平:應(yīng)用Primer premier5.0軟件設(shè)計特異性引物，RT-PCR技術(shù)檢測Cks2的mRNA水平，通過特異Cks2抗體，運

5、用western-blot檢測Cks2的蛋白水平。
　　(2)通過免疫組化技術(shù)運用SP三步法檢測Cks2在卵巢漿液性癌中的表達水平，并結(jié)合臨床情況及隨訪結(jié)果，應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，進行Spearman相關(guān)分析及生存分析。
　　(3)通過免疫組化技術(shù)運用SP三步法檢測Cks2、P53、Cyclin E在卵巢漿液性癌中的表達情況，并進行應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，進行kappa一致性檢驗。
　　結(jié)

6、果:
　　(1)Cks2在卵巢漿液性癌組織中的mRNA水平高于非漿液性癌組織，明顯高于正常輸卵管傘端上皮組織以及正常卵巢上皮組織;Cks2在卵巢漿液性癌組織中蛋白表達水平明顯高于正常輸卵管傘端上皮組織。
　　(2)Cks2在卵巢漿液性癌組織中高表達的比例最高(62.7％)，在卵巢子宮內(nèi)膜樣癌中高表達比例稍低(52.3％)，在卵巢粘液性癌中Cks2高表達者占41.7％，在卵巢透明細胞癌中Cks2高表達者比例最低(8.3％)。C

7、ks2在正常輸卵管傘端上皮中主要表達于分泌細胞，且陽性率低于10％-30％。
　　(3)Cks2與卵巢漿液性癌臨床分期相關(guān)(P＜0.05)，與腫瘤患者腹水量、是否存在宮旁浸潤、以及術(shù)后腫瘤殘余范圍相關(guān)，作K-M生存分析顯示低水平Cks2患者與高水平Cks2患者生存時間相比明顯延長(P＜0.01)。
　　(4)P53與CCNE1的kappa系數(shù)為0.22(P＜0.01)、Cks2與CCNE1的kappa系數(shù)為0.17(P＜0.

8、01)，P53與Cks2綜合起來與CCNE1的kappa系數(shù)為0.459(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　(1)卵巢上皮性癌中Cks2存在明顯過表達，其中漿液性癌與子宮內(nèi)膜樣癌中過表達最為明顯，存在組織差異性表達。
　　(2)Cks2的升高與卵巢漿液性癌的臨床分期等因素相關(guān)，能夠作為患者預(yù)后預(yù)測依據(jù)。Cks2表達水平高的卵巢漿液性患者其生存時間較短。
　　(3)Cks2在卵巢漿液性癌中過表達與P53及CCNE1