抗真菌農(nóng)用抗生素分離及發(fā)酵工藝優(yōu)化的初步研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室從土壤中篩選得到利迪鏈霉菌變種AS 4.2501(Streptomyces lydicus AS 4.2501)。該菌能產(chǎn)生抗植物真菌病害的拮抗物，對(duì)棉花立枯病、小麥赤霉病、番茄早疫病等18種病原菌都有明顯的抑制作用，具有較高的生物活性和良好的工業(yè)化產(chǎn)品開(kāi)發(fā)潛力。本文在搖瓶水平上，對(duì)利迪鏈霉菌的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，并將其應(yīng)用到2L發(fā)酵罐水平上，考察了利迪鏈霉菌AS4.2501的發(fā)酵過(guò)程規(guī)律；綜合利用吸附法、溶媒萃取法和硅膠柱層析

2、法對(duì)抗生素進(jìn)行了純化。 以立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)作為生物活性檢驗(yàn)指示菌，在搖瓶水平上運(yùn)用利用單因子實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基配方進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明優(yōu)化后的培養(yǎng)基使發(fā)酵液的抑菌率從原來(lái)的65.9％提高到78.6％，相對(duì)增長(zhǎng)19.2％。 通過(guò)測(cè)定還原糖含量、菌濃、pH值、溶氧、抑菌率等參數(shù)，考察了生產(chǎn)菌株在2L發(fā)酵罐中的發(fā)酵過(guò)程規(guī)律。結(jié)果表明優(yōu)化培養(yǎng)基明顯縮短菌體的延滯期，在30h菌濃達(dá)到最高，

3、13.3mg/mL，較原始培養(yǎng)基提高了44.6％；發(fā)酵液抑菌率最大值為83.1％，較原始培養(yǎng)基的82.4％略有提高，而抑菌率的最大峰值出現(xiàn)的時(shí)間從54h提前到了36h，縮短了生產(chǎn)周期。 經(jīng)預(yù)處理的發(fā)酵液分別經(jīng)活性炭和Dimon HP-20大孔樹(shù)脂吸附，洗脫液濃縮后再用等體積的正丁醇萃取，取有機(jī)相濃縮后，上樣到預(yù)先制好的硅膠層析柱，以氯仿：甲醇：29％氨水(5:3:1)為流動(dòng)相進(jìn)行分離，得到了組分較為簡(jiǎn)單且具有很強(qiáng)抑茵活性的樣品。