抗病毒農(nóng)用抗生素SN03的研究.pdf

1、本研究針對(duì)植物病毒病害，初步研究了抗病毒農(nóng)用抗生素SN03，并對(duì)其防治效果、發(fā)酵條件、分離純化工藝和作用機(jī)理進(jìn)行了研究，結(jié)果如下： 1.鏈霉菌菌株Streptomyces1123發(fā)酵液對(duì)TMV有很好的防治效果，對(duì)植物病原真菌和細(xì)菌有很好的抑菌作用，抑菌譜較廣。研究結(jié)果表明，發(fā)酵液在心葉煙上對(duì)TMV有很好的預(yù)防和鈍化作用，鈍化10min和提前24h噴施發(fā)酵液可有效降低TMV的侵染，枯斑抑制率高達(dá)93.88％和87.93％，對(duì)TMV

2、侵染后也有一定的治療作用；發(fā)酵液對(duì)引起根部、葉斑類(lèi)和苗期病害的20種病原菌均有較好的抑制作用，其中，對(duì)煙草黑脛病菌(Phytophthoraparasiticavar.nicotianae)和黃瓜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)的抑菌圈直徑達(dá)50.36mm和56.26mm。 2.鏈霉菌菌株Streptomyces1123搖瓶發(fā)酵的最佳碳源為可溶性淀粉，最佳氮源為花生餅粉，搖瓶發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基組成為(％)

3、：可溶性淀粉4，花生餅粉2，硫酸銨0.2，碳酸鈣0.8，氯化鈉0.8。搖瓶發(fā)酵最佳條件為：斜面菌齡培養(yǎng)時(shí)間為5d～10d、接種量為8％～12％，培養(yǎng)基起始pH值4.0～6.0，發(fā)酵溫度28℃～30℃，裝液量30mL/250mL三角瓶，轉(zhuǎn)速160r/min～200r/min，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為96h。研究還表明，該菌株在發(fā)酵過(guò)程中對(duì)磷酸鹽有較強(qiáng)的適應(yīng)力，磷酸鹽含量在0.01％～0.04％范圍內(nèi)對(duì)農(nóng)抗SN03的產(chǎn)生基本無(wú)抑制作用。加入適量的硫酸

4、錳可明顯提高SN03產(chǎn)量，而硫酸銅和硫酸鋅則抑制抗生素SN03的產(chǎn)生。 3.農(nóng)抗SN03為水溶堿性核苷類(lèi)抗生素，對(duì)光、熱、酸堿性都有較好的穩(wěn)定性，對(duì)紫外線的穩(wěn)定性稍差一些。通過(guò)DiaionHP20大孔樹(shù)脂和732強(qiáng)酸性陽(yáng)離子樹(shù)脂的吸附交換，薄層層析，SephadexLH-20葡聚糖凝膠分離和無(wú)水乙醇沉淀可得到農(nóng)抗SN03粗提品。研究結(jié)果表明，農(nóng)抗SN03在捷克八溶劑系統(tǒng)中的紙層析圖譜與慶豐霉素、云南霉素等十分相似，因此可初步推斷

5、其為水溶抗生素；pH紙層析和紙電泳結(jié)果表明農(nóng)抗SN03含有堿性或弱堿性的活性組分；其紫外吸收?qǐng)D譜表明，農(nóng)抗SN03屬于核苷類(lèi)抗生素。 4.農(nóng)抗SN03對(duì)病毒粒子有明顯的體外鈍化作用，對(duì)TMV在心葉煙上的擴(kuò)展有一定的抑制作用，鈍化30min后，對(duì)病毒粒子的結(jié)構(gòu)有一定程度的破壞作用。通過(guò)分光光度計(jì)法和生物測(cè)定法，比較了處理和對(duì)照植株體內(nèi)的病毒濃度，結(jié)果表明經(jīng)SN03處理的植株，其體內(nèi)病毒濃度明顯低于對(duì)照。對(duì)寄主誘導(dǎo)抗性的研究表明，農(nóng)