八種中草藥中抗腫瘤活性物質體外篩選及其機制初探.pdf

1、該實驗進行了抗腫瘤活性物質體外篩選及其作用機制的研究.首先用MMT法對蕓香草、半邊蓮、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪術等8種中草藥作用于癌細胞進行篩選.結果表明,濃度為1.0-1-5mg/ml的甘草乙醇浸提液(ESCG)、莪術乙醇浸提液(ESCC)和柴胡乙醇浸提液(ESCB)對體外培養(yǎng)的肝癌細胞SMMC-7721和肺癌細胞SPC-A1有較強的抑制增殖作用.在一定范圍內,抑制作用隨著濃度的加大而加強,并且隨著時間的延長,細胞成活率呈現

2、下降趨勢.在濃度1.0-1.5mg/ml時,6-12小時是ESCB和ESCG對腫瘤細胞的最佳抑制時間,而ESCC最佳作用時間則是在12-24小時.曲線抑制率的計算還表明:活性物質對腫瘤細胞的作用,更大地依賴于活性物質本身,而不是腫瘤細胞株.將1.5mg/ml ESCG、ESCC和ESCB分別作用于癌細胞,光鏡下72小時內可見具"凋亡"形態(tài)的細胞:胞質濃縮,膜起小泡,出現凋亡小體,膜仍具完整性.用Hoechst33342及PI熒光染料對活

3、性物質作用下的細胞進行聯合染色,可以看到,不僅有發(fā)出紅色熒光的壞死細胞和發(fā)出藍色熒光的正常細胞,還有發(fā)出草藍色熒光的凋亡細胞.提取細胞DNA進行瓊脂糖凝膠電泳,出現明顯的"DNA ladder",表明一定濃度的ESCG、ESCC和ESCB在體外能誘導肺癌細胞SPC-A1和肝癌細胞SMMC-7721凋亡.凋亡曲線證明了腫瘤細胞的凋亡率隨著活性物質濃度的增大而增大.以上結果表明,在體外ESCG、ESCC和ESCB對肝癌細胞SMMC-7721