多供體造血干細(xì)胞移植術(shù)后的嵌合率定量檢測.pdf

1、目的：
　　 在多供體造血干細(xì)胞移植術(shù)后，運用熒光標(biāo)記的多重PCR擴(kuò)增短串聯(lián)重復(fù)序列(STR-PCR)的方法，建立檢測供體細(xì)胞嵌合率的計算模型并簡化計算方法。
　　 方法：
　　 以2010年2月～2012年6月在蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院接受異基因造血干細(xì)胞移植的血液系統(tǒng)疾病患者為研究對象，采用STR-PCR結(jié)合毛細(xì)管電泳的方法，檢測移植后供體細(xì)胞嵌合率。
　　 1.選取單供體或雙供體移植術(shù)后，混合嵌合狀態(tài)下

2、的外周血或骨髓樣本，比較STR位點中同一個體來源的等位基因的雙峰面積。
　　 2.對常見嵌合狀態(tài)下STR各峰面積進(jìn)行賦值，比較嵌合率準(zhǔn)確值與近似值之間的差異。
　　 結(jié)果：
　　 1.混合嵌合狀態(tài)下，同一個體來源的等位基因的雙峰面積和高度是近似的，可以互相替代。
　　 2.基于“替代”的設(shè)想，構(gòu)建常見嵌合狀態(tài)的計算模型并簡化計算方法。
　　 3.對構(gòu)建的計算模型中各等位基因的峰面積進(jìn)行賦值，得到的

3、嵌合率準(zhǔn)確值和近似值在可接受的計量系統(tǒng)自身誤差范圍內(nèi)(△<20％)是基本沒有差異的。
　　 結(jié)論：
　　 1.混合嵌合狀態(tài)下，來自于同一個體的等位基因在STR位點的圖譜上表現(xiàn)出來的峰具有近似的峰高和峰面積。以此為基礎(chǔ)，提出將非共享峰替代共享峰面積的設(shè)想，用作計算近似嵌合率。
　　 2.基于“替代”的設(shè)想，確定了有效位點的選擇標(biāo)準(zhǔn)，構(gòu)建了常見嵌合狀態(tài)的計算模型，并簡化了計算方法。發(fā)現(xiàn)多供體移植后，混合嵌合狀態(tài)下，受