結(jié)締組織生長(zhǎng)因子促進(jìn)半月板無(wú)血管區(qū)損傷愈合.pdf

1、目的：探討結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)對(duì)纖維軟骨細(xì)胞外基質(zhì)分泌、VEGF表達(dá)與促進(jìn)半月板無(wú)血管區(qū)損傷修復(fù)中的作用，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：將新西蘭大白兔半月板白區(qū)，經(jīng)膠原酶消化、離心分離后，提取半月板纖維軟骨細(xì)胞，培養(yǎng)至第2代。用流式細(xì)胞儀鑒定該細(xì)胞表面CD44，CD45和CD105標(biāo)志物，并用11型膠原抗體做免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定，以證明所培養(yǎng)、傳代的細(xì)胞是纖維軟骨細(xì)胞。分別將細(xì)胞在濃度為lOOng／ml的CTG

2、F培養(yǎng)基中培養(yǎng)3天和14天后，通過(guò)實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)，檢測(cè)I型膠原、11型膠原和VEGF基因的表達(dá)變化情況。將45只大白兔隨機(jī)分為3組，在兔半月板無(wú)血管區(qū)，制作長(zhǎng)3mm的縱形撕裂。處理方式為：?jiǎn)渭儼朐掳蹇p合術(shù)、縫合術(shù)+填充PBS-纖維蛋白膠，縫合術(shù)+填充1，5ugCTGF-纖維蛋白膠。術(shù)后第1周、4周、10周，用熒光免疫組織化學(xué)分析法，顯示I型膠原、11型膠原和VEGF在損傷處的表達(dá)與分布情況，直觀撕裂處的愈合情況。
　　結(jié)果：

3、體外實(shí)驗(yàn)第14天，定董RT-PCR結(jié)果顯示，lOOng／mlCTGF組中的I型膠原，II型膠原和VEGFmRNA表達(dá)比PBS對(duì)照組，分別增加了2，38+O，63倍，2，96+0.87倍，2，14+0，56倍（統(tǒng)計(jì)學(xué)均有顯著性差異）。體內(nèi)試驗(yàn)的熒光免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，在術(shù)后第10周，CTGF治療組中的I型膠原，II型膠原和VEGF已完全填充撕裂損傷處。PBS-蛋白膠組中，損傷處仍有明顯裂隙。
　　結(jié)論：CTGF可促進(jìn)半月板無(wú)血管區(qū)