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1、目的:Ⅰ型膠原羧基端交聯(lián)肽(C-terminal telopeptides oftype Ⅰ collagen,CTX)是Ⅰ型膠原的降解產(chǎn)物,為骨吸收的特異標(biāo)志物。本研究的目的在于檢測(cè)健康人和牙周炎患者齦溝液中骨轉(zhuǎn)化標(biāo)記物CTX的水平,研究其在牙周炎病變過(guò)程中的變化趨勢(shì),探討其對(duì)牙周炎活動(dòng)期診斷的價(jià)值,并通過(guò)齦下菌斑胰蛋白酶樣酶水平與齦溝液中CTX濃度的相關(guān)分析,初探牙周炎重要可疑致病微生物所產(chǎn)生的胰蛋白酶樣酶在Ⅰ型膠原降解中的作用。
2、 方法: 1 臨床資料: 本實(shí)驗(yàn)選取到和平醫(yī)院口腔科門(mén)診就診的牙周炎患者和和平醫(yī)院口腔科醫(yī)護(hù)人員共60例,采集齦溝液標(biāo)本和相對(duì)應(yīng)的齦下菌斑標(biāo)本各77份。 2 記錄臨床指數(shù): 菌斑指數(shù):據(jù)Quigley-Hein標(biāo)準(zhǔn),分為0-5級(jí)牙齦指數(shù):據(jù)Loe-Silness標(biāo)準(zhǔn),分為0-3級(jí)牙周袋最大探診深度:要求探測(cè)從袋底(或齦溝)到齦緣的距離,探診牙周袋或齦溝的最深點(diǎn)記錄為最大探診深度。附著喪失:分為無(wú)附著
3、喪失、輕度附著喪失、中度附著喪失、重度附著喪失四個(gè)等級(jí)牙齒松動(dòng)度:分為Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度 3 使用CTX ELISA試劑盒測(cè)定齦溝液中CTX水平4 液相BlANA試驗(yàn): 取1mM的BANA 100μl加入酶聯(lián)反應(yīng)板孔內(nèi),然后加入100μl菌斑標(biāo)本,37℃孵育過(guò)夜,次日酶聯(lián)反應(yīng)板孔內(nèi)加入0.25%堅(jiān)牢黑K鹽呈色,37℃,5分鐘后觀測(cè)結(jié)果。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定450nm波長(zhǎng)下光密度值。 結(jié)果: 1 健康牙齦組齦
4、溝液中CTX測(cè)定結(jié)果: 30份健康牙齦組齦溝液中CTX的濃度均值為140.17±32.94nmol/l。 2 成人牙周炎組齦溝液CTX水平測(cè)定結(jié)果: 47份成人牙周炎齦溝液中CTX濃度均值為362.07±165.26nmol/1。 3 21份成人牙周炎活動(dòng)期組齦溝液中CTX濃度測(cè)定值的中位數(shù)M為:522.21,推算本組齦溝液CTX濃度值95%可信區(qū)間為:382.78-786.4 1nmol/1。
5、26份成人牙周炎相對(duì)靜止期組齦溝液CTX濃度測(cè)定值的中位數(shù)M為:250.29,推算本組齦溝液CTX濃度值95%可信區(qū)間為:180.24-354.58nmol/l。 4 健康牙齦組、成人牙周炎組齦溝液CTX水平測(cè)定結(jié)果:兩組齦溝液CTX濃度的測(cè)定值,經(jīng)方差分析方差不齊,秩和檢驗(yàn)(Mann-Whimey Test)P=0.000,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5 成人牙周炎活動(dòng)期組與相對(duì)靜止期組齦溝液CTX水平測(cè)定結(jié)果:
6、 成人牙周炎活動(dòng)期組與相對(duì)靜止期組齦溝液CTX濃度的測(cè)定值為偏態(tài)資料,采用秩和檢驗(yàn)(Mann-Whitney Test)P=0.000,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6 臨床指數(shù)與齦溝液CTX測(cè)定值的關(guān)系6.1 菌斑指數(shù)與齦溝液CTX測(cè)定值的關(guān)系菌斑指數(shù)不同分值所對(duì)應(yīng)的齦溝液CTX的濃度,經(jīng)秩和檢驗(yàn)P<0.05,提示菌斑指數(shù)不同分值所對(duì)應(yīng)的齦溝液CTX濃度之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 齦溝液中CTX的濃度與菌斑指
7、數(shù)的關(guān)系,經(jīng)Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)r=0.386,P=0.000;P<0.05,提示齦溝液中的CTX的濃度與菌斑指數(shù)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在正相關(guān)。 6.2 牙齦指數(shù)與齦溝液CTX測(cè)定值的關(guān)系將牙齦指數(shù)為0或1的受試牙合并為一組(因牙齦指數(shù)為1的樣本數(shù)僅2例)分別與牙齦指數(shù)為2、3所對(duì)應(yīng)的齦溝液中CTX的濃度,作統(tǒng)計(jì)分析,經(jīng)秩和檢驗(yàn)P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 齦溝液中CTX的濃度與牙齦指數(shù)的關(guān)系,經(jīng)Spearman秩相關(guān)
8、檢驗(yàn)r=0.366,P=0.000;P<0.05,提示齦溝液中的CTX的濃度與牙齦指數(shù)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在正相關(guān)。 6.3 牙周袋最大探診深度與齦溝液CTX測(cè)定值的關(guān)系不同牙周袋最大探診深度所對(duì)應(yīng)的齦溝液中CTX濃度的測(cè)定值,經(jīng)秩和檢驗(yàn)P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 齦溝液中CTX濃度與牙周探診深度的關(guān)系,經(jīng)Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)r=0.382,P=0.000;P<0.05,提示齦溝液中CTX的濃度與牙周探診深度在統(tǒng)計(jì)學(xué)
9、上存在正相關(guān)。 6.4 附著喪失與齦溝液CTX測(cè)定值的關(guān)系無(wú)附著喪失和輕度附著喪失(由于輕度附著喪失樣本數(shù)太少,將其兩者合并為一組)與中度附著喪失、重度附著喪失組對(duì)應(yīng)的齦溝液中CTX的濃度,經(jīng)秩和檢驗(yàn)P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。齦溝液中CTX的濃度與附著喪失的關(guān)系,經(jīng)Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)r=0.314,P=0.000;P<0.05,提示齦溝液中的CTX的濃度與附著喪失在統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在正相關(guān)。 6.5 牙齒松動(dòng)度與
10、齦溝液CTX測(cè)定值的關(guān)系不同牙齒松動(dòng)度所對(duì)應(yīng)齦溝液中CTX的濃度,經(jīng)秩和檢驗(yàn)P>0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 7 CTX濃度的測(cè)定值與齦下菌斑BANA測(cè)定值的關(guān)系齦溝液CTX的濃度與齦下菌斑標(biāo)本BANA試驗(yàn)OD<,450nm>測(cè)定值的關(guān)系經(jīng)Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)r=0.468,P=0.000;P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示齦溝液中CTX的濃度與BANA實(shí)驗(yàn)OD<,450nm>測(cè)定值在統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在正相關(guān)。 結(jié)論:
11、 1 健康牙齦組齦溝液中CTX平均濃度為140.17±32.94mol/l;牙周炎組齦溝液中CTX平均濃度為362.07±165.26nmol/l。推算出牙周炎活動(dòng)期組齦溝液中CTX濃度值95%參考值范圍為:382.78-786.41nmol/l:牙周炎相對(duì)靜止期組齦溝液中CTX濃度值95%參考值范圍為: 180.24-354.58nmol/l。 2 成人牙周炎組齦溝液CTX的濃度明顯高于健康牙齦組。提示齦溝液中CTX水
12、平的變化與牙周病變發(fā)展密切相關(guān),齦溝液中CTX的水平有可能作為評(píng)價(jià)牙周炎牙周組織破壞程度的參考指標(biāo)。 3 牙周炎是一種活動(dòng)期、靜止期交替的組織病變。本課題證實(shí)了在活動(dòng)期牙周炎患者齦溝液中CTX的濃度值明顯高于相對(duì)靜止期,提示齦溝液中CTX水平可作為判斷牙周炎活動(dòng)期的參考指標(biāo)。 4 齦溝液中CTX濃度的測(cè)定值與菌斑指數(shù)、牙齦指數(shù)、牙周探診深度、附著喪失在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均存在正相關(guān)關(guān)系,但表示關(guān)系密切程度的確定系數(shù)(r2)的數(shù)值均不大。提
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