首烏益智膠囊對(duì)血管性認(rèn)知障礙大鼠Notch信號(hào)通路相關(guān)基因及星形膠質(zhì)細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的:血管性認(rèn)知障礙(VCI)近年來(lái)發(fā)病率和死亡率逐漸攀升，已成為全社會(huì)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞之間的相互作用,是缺血性腦損傷后神經(jīng)元能否存活的關(guān)鍵因素。本研究以Notch信號(hào)通路和星形膠質(zhì)細(xì)胞為切入點(diǎn),通過(guò)首烏益智膠囊治療前后細(xì)胞變化及基因表達(dá)水平的改變,探討其作用機(jī)制。為首烏益智膠囊治療VCI從細(xì)胞水平和基因調(diào)控方面提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。
　　方法:將SD大鼠通過(guò)線栓法制備大腦中動(dòng)脈局灶腦缺血/再灌注VCI模

2、型,經(jīng)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)篩選出80只大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、腦復(fù)康組、首烏益智膠囊組,每組20只。造模后藥物干預(yù)4周。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠行為學(xué)改變;尼氏染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;透射電鏡觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)海馬CA1區(qū)GFAP、NGF的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Notch信號(hào)通路相關(guān)基因Notch1、PS1、Hes3、STAT3、GFAP、β-APP的表

3、達(dá)。
　　結(jié)果:水迷宮結(jié)果表明,首烏益智膠囊組大鼠的定位航行和空間探索實(shí)驗(yàn)測(cè)試成績(jī)明顯優(yōu)于模型組和腦復(fù)康組(P＜0.01)。與模型組和腦復(fù)康組比較,首烏益智膠囊組海馬錐體細(xì)胞排列較整齊、密集,胞漿中Nissl體較豐富;電鏡觀察細(xì)胞器結(jié)構(gòu)基本正常。首烏益智膠囊組海馬CA1區(qū)GFAP、NGF的表達(dá)較模型組和腦復(fù)康組顯著升高(P＜0.01)。與模型組比較,首烏益智膠囊組大鼠腦組織Notch1、Hes3、Stat3基因的表達(dá),顯著升高(P

4、＜0.01);與腦復(fù)康組比較,亦有明顯升高(P＜0.05)。首烏益智膠囊組GFAP基因的表達(dá)較模型組和腦復(fù)康組顯著升高(P＜0.01)。首烏益智膠囊組PS1基因的表達(dá)較模型組顯著降低(P＜0.01),較腦復(fù)康組亦有明顯降低(P＜0.05)。首烏益智膠囊組β-APP基因的表達(dá)較模型組明顯降低(P＜0.05);較腦復(fù)康組降低,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1.首烏益智膠囊能保護(hù)神經(jīng)元,減輕腦缺血對(duì)神經(jīng)元的損傷,維持神經(jīng)細(xì)胞

5、結(jié)構(gòu)與功能的完整。2.首烏益智膠囊能提高Notch信號(hào)通路Notch1、Stat3、Hes3、GFAP基因的表達(dá),促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向星形膠質(zhì)細(xì)胞分化、增殖;促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)的合成與分泌,對(duì)受損神經(jīng)元產(chǎn)生保護(hù)、營(yíng)養(yǎng)、修復(fù)和再生作用。3.首烏益智膠囊能降低PS1、β-APP基因的表達(dá),使Aβ生成減少,減輕Aβ神經(jīng)毒性,改善學(xué)習(xí)記憶能力。4.首烏益智膠囊能顯著提高VCI大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力,是治療VCI的有效方藥,整體療效優(yōu)于腦復(fù)康。