實(shí)驗(yàn)性血管性認(rèn)知障礙關(guān)于膽堿能機(jī)制的研究.pdf

1、分類號(hào)：R743密級：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位口專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼：10062學(xué)號(hào)：2010601055學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)又坪眚科鼻號(hào)博士學(xué)位論文DoCToRALDISSERTATIoN論文題目：實(shí)驗(yàn)性血管性認(rèn)知障礙關(guān)于膽堿能機(jī)制的研究TITLETheresearchofcholinergiedeficiencymechanismintheexperimentalvascularcognitiveimpairment一級學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科：神

2、經(jīng)病學(xué)論文作者：孫亞男指導(dǎo)教師：程焱導(dǎo)師組成員：郝峻巍教授教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二o～四年五月天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要背景和目的：目前諸多研究證明中樞膽堿能機(jī)制參與了VaD的發(fā)病。膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)、乙酰膽堿酯酶(ACHE)，囊泡乙酰膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體(VACHT)是膽堿能系統(tǒng)的重要組成部分，維持著乙酰膽堿(ACH)的動(dòng)態(tài)平衡。本文將探索VaD大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化及其海馬CHAT、ACHE、VACHT蛋白表達(dá)的變化，并觀

3、察不同作用機(jī)制的藥物鹽酸多奈哌齊、丁苯酞(NBP)、紅花黃色素(HSYO)、芬戈莫德(FTY720)對VaD大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力和海馬BDNF、VEGF、CHAT、ACHE、VACHT的影響，從而為VaD的藥物治療提供多方向新的靶點(diǎn)和理論依據(jù)。方法：本實(shí)驗(yàn)采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法(2VO)建立VaD大鼠模型，運(yùn)用水迷宮方法檢測VaD大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，首次同時(shí)應(yīng)用westernblot方法、免疫熒光染色檢測VAD大鼠海馬CHAT、AC

4、HE、VACHT的蛋白表達(dá)，來觀察膽堿能機(jī)制與VaD的關(guān)系。并應(yīng)用丁苯肽、紅花黃色素、FTY720對VAD大鼠進(jìn)行干預(yù)，同時(shí)應(yīng)用westernblot方法、免疫組化染色或免疫熒光染色的方法，以及RealTimePCR方法，首次檢測上述藥物對大鼠海馬CHAT、ACHE、VACHT、VEGF、BDNF表達(dá)的影響，觀察上述藥物對VaD大鼠膽堿能系統(tǒng)和空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響。結(jié)果：1：11模型組大鼠每日的逃避潛伏期均比丁F常組(C組)和假手術(shù)組

5、(S組)明顯延長(PO05)。模型組大鼠目標(biāo)象限百分率明顯低于正常組和假手術(shù)組(尺005)。12模型組大鼠海馬區(qū)CHAT、ACHE、VACHT蛋白表達(dá)與正常對照和假手術(shù)比較明顯下調(diào)。13HE染色：正常組和假手術(shù)組大鼠海馬區(qū)細(xì)胞邊界清楚，胞質(zhì)呈淡紅色，胞核呈藍(lán)色，突起整齊排列于福射層，高倍鏡下可見部分核仁。VaD模型組大鼠海馬CAI區(qū)細(xì)胞層數(shù)和數(shù)量減少，排列紊亂，細(xì)胞體積明顯縮小，部分細(xì)胞呈空泡樣變，大量細(xì)胞發(fā)生死亡，可見核固縮、核破裂，