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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雌、孕激素對人宮頸癌細胞株Hela細胞體外生長的影響姓名:袁芳申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:王惠蘭;黃向華2003.3.1中文摘要3 分:0 分為不著色;1 分為著色淺,呈淡黃色;2 分為中度著色,呈深黃色;3 分為著色深,呈棕色/咖啡色。P i 代表每一著色程度的細胞所占的比例,為0 - 1 0 0 %,H .s c o r e = ∑P i ( i + 1 ) ,滿分為4 分。3 .細胞增殖實驗:
2、取對數(shù)生長期的H e l a 細胞,制成濃度為3 ×1 0 1 個/m l 的單細胞懸液,接種到9 6 孔培養(yǎng)板,每孔2 0 0 u l ,過夜貼壁,4 。C 培養(yǎng)l h ,以促進細胞同步化生長:換培養(yǎng)液,實驗組根據(jù)加入藥物的不同分為E 2 組、P 組和E 2 + P 組,E 2 組分別加入含E 20 .5 0 、1 .0 0 、5 .0 0 和1 0 .0 0 n m o l /L ( n M ) 的培養(yǎng)液,P 組分別加入含
3、P0 .0 1 、0 .1 0 、1 .0 0 和1 0 .0 0 u m o l /L ( u M ) 的培養(yǎng)液,E 2 + P 組中E 2 和P 的終濃度分別同E 2 組、P組:對照組加入含O .0 3 %乙醇的培養(yǎng)液,每一濃度均設(shè)8 個復(fù)孔,繼續(xù)培養(yǎng)7 2 h 后,每孔加入2 0 u l 濃度為5 m g /m l 的M T T 溶液,繼續(xù)孵育4 h 后吸凈上清液,每孔加入二甲亞砜2 0 0 u l ,振蕩1 0 m i n ,用
4、酶標光度儀在波長為4 9 2 n m 時測定每孔的吸光度( 彳) 值,并計算抑制率( 抑制率= 對照組A 值一實驗組A 值/對照組爿值) 。本實驗重復(fù)3 次。4 .細胞周期和細胞凋亡率的檢測:將濃度為3 ×1 0 4個/m l 的H e l a 單細胞懸液,接種于1 0 0 m l 培養(yǎng)瓶,過夜貼壁,同步化處理后換培養(yǎng)液,實驗組取各組最大濃度,即E 2 組含E 2 為1 0 .0 0 r d M ,P 組含P 為1 0 .0
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