奈達(dá)鉑聯(lián)合順鉑體外干預(yù)人卵巢癌細(xì)胞株Skov-3和宮頸癌細(xì)胞株Hela增殖凋亡.pdf

1、目的：體外環(huán)境下，研究奈達(dá)鉑（NDP）聯(lián)合順鉑（DDP）對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株Skov-3及宮頸癌細(xì)胞株Hela的增殖及凋亡的影響，探討分子機(jī)制。 方法：NDP單藥，DDP單藥及NDP+DDP聯(lián)合用藥方式多種劑量分別干預(yù)人卵巢癌細(xì)胞株Skov-3及宮頸癌細(xì)胞株Hela；MTT法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞增殖抑制率變化；中效原理法判斷聯(lián)合用藥的相互作用；流式細(xì)胞分析凋亡細(xì)胞比例；RT-PCR和蛋白印跡法分析細(xì)胞增殖/凋亡相關(guān)基因Ki67、Bax、Bc

2、l-2 mRNM蛋白表達(dá)水平變化，以各條帶的灰度值為觀測(cè)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。應(yīng)用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、方差分析，P<0．05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：各種干預(yù)均明顯抑制Skov-3及Hela細(xì)胞增殖，呈劑量依賴，48小時(shí)skov-3細(xì)胞奈達(dá)鉑各濃度組（4mg/L，8mg/L，16mg/L，32mg/L，64mg/L）的抑制率為21．53±0．54％，28．42±1．90％，37．3

3、8±1．59％，41．10±2．27％，67．29±0．78％，順鉑各濃度組（5mg/L，10mg/L，20mg/L，40mg/L，80mg/L）的抑制率為13．86±1．46％，19．03±2．82％，36．23±3．01％，63．67±3．11％，83．50±1．71％，差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。48小時(shí)Hela細(xì)胞奈達(dá)鉑各濃度組（4mg/L，8mg/L，16mg/L，32mg/L，64mg/L）的抑制率為14．56±1．79％，24．8

4、7±2．00％，38．86±1．22％，55．31±2．91％，68．94±2．16％，順鉑各濃度組（5mg/L，10mg/L，20mg/L，40mg/L，80mg/L）的抑制率為14．78±1．39％，23．54±2．17％，46．32±2．17％，67．12±1．14％，88．17±0．78％，差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩者聯(lián)合使用時(shí)，當(dāng)Skov-3細(xì)胞抑制率fa>20％，Hela細(xì)胞fa>25％時(shí)兩藥合用指數(shù)CI<1，為協(xié)同效應(yīng)。IC5

5、0濃度的NDP（32mg/L Skov-3，26mg/L Hda）、DDP（26mg/L Skov-3，21mg/L Hela）和1/2IC50NDP+1/2IC50DDP（16+13mg/L Skov-3，13+10．5mg/L Hela），對(duì)Skov-3和Hela細(xì)胞的抑制率分別為39．04±1．26％，45．04±1．45％，56．21±1．44％和44．76±2．11％，46．90±0．99％，56．63±1．83％，差異具有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明正常對(duì)照組、以上濃度的NDP組或DDP組、聯(lián)合用藥組細(xì)胞凋亡率依次增加，分別為2．27±0．31％，16．57±1．12％，21．83±1．32％，28．20±0．66％（Skov-3）和2．47±0．15％，17．95±0．64％，19．95±0．78％，27．80±1．05％（Hela），差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分別與單獨(dú)用藥組比較，聯(lián)合用藥Ki67、 Bcl-2mRNA/蛋白表達(dá)均顯著降低，BaxmRNA/蛋