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文檔簡(jiǎn)介
1、子宮內(nèi)膜癌目前已經(jīng)成為發(fā)病率最高的女性惡性盆腔生殖道腫瘤,約占女性癌癥總數(shù)的7%,嚴(yán)重威脅女性健康。子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究表明。惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展不僅與腫瘤細(xì)胞異常增殖和分化有關(guān),而且與細(xì)胞凋亡抑制,凋亡不足有關(guān),凋亡與增殖失衡是惡性腫瘤形成的重要機(jī)制之一。在子宮內(nèi)膜從正常轉(zhuǎn)變?yōu)楫惓T錾涟┳兊倪^(guò)程中,凋亡調(diào)節(jié)紊亂是較重要的環(huán)節(jié)之一。Livin是最新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)凋亡抑制蛋白家族成員,不但具有抑制細(xì)胞凋亡的功能,而
2、且其表達(dá)具有明顯的組織特異性,已發(fā)現(xiàn)其在多種腫瘤細(xì)胞中異常表達(dá),與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切。PTEN基因已是公認(rèn)的抑癌基因,最近研究表明:其抑癌作用機(jī)制主要是通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的,PTEN可通過(guò)抑制P13K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。 本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化染色,免疫印跡法及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)研究正常子宮內(nèi)膜組織、子宮內(nèi)膜癌及癌前病變組織中Livin、PTEN、P13K的表達(dá)及其相關(guān)性,探討其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展中的意義,為
3、子宮內(nèi)膜癌的診斷和治療提供理論依據(jù)。 材料與方法: 一、臨床病例資料本實(shí)驗(yàn)以中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科2003年1月~2006年4月婦科手術(shù)所取的良惡性子宮內(nèi)膜共58例為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,所有患者術(shù)前均未做化療、放療及激素治療,術(shù)后經(jīng)常規(guī)病理確診,年齡為31~74歲,平均年齡52.2歲。 二、實(shí)驗(yàn)方法 采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)58例良惡性子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本中l(wèi)ivin、PTEN及P13K蛋白的表達(dá)。Livin、
4、PTEN蛋白以胞漿或胞核中出現(xiàn)清晰的棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色,P13K蛋白主要定位于胞漿,胞漿含有棕黃色顆粒為陽(yáng)性。采用免疫印跡法檢測(cè)58例良惡性子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本中l(wèi)ivinα,livinβ,PTEN及P13K蛋白表達(dá)量;采用RT-PCR法檢測(cè)上述58例標(biāo)本中l(wèi)ivin mRNA的表達(dá)量。 三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示,采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及相關(guān)分析,P<0.05表示有顯著性
5、差異。 結(jié)果: (一)Livin蛋白及mRNA在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌及癌前病變中的表達(dá)免疫組化結(jié)果顯示livin蛋白主要分布于細(xì)胞質(zhì),少量分布于細(xì)胞核,在良性子宮內(nèi)膜組織中低表達(dá),在子宮內(nèi)膜癌及非典型增生組織中高表達(dá),三者比較有顯著性差異(F=41.052,P<0.001)。免疫印記法及RT-PCR結(jié)果與免疫組化結(jié)果一致,livin蛋白和livin mRNA的表達(dá)量與子宮內(nèi)膜癌組織病理分級(jí)及肌層浸潤(rùn)深度有關(guān)(P<0.
6、001),與手術(shù)病理分期無(wú)關(guān),且在同類型組織中l(wèi)ivinβ的表達(dá)量均高于livinα(F=0.827,P<0.05;F=10.09,P=0.005)。 (二)PTEN蛋白在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌及癌前病變中的表達(dá)免疫組化結(jié)果顯示PTEN蛋白主要分布于細(xì)胞質(zhì),少量分布于細(xì)胞核,在良性子宮內(nèi)膜組織中高表達(dá),在子宮內(nèi)膜癌及非典型增生組織中低表達(dá),三者比較有顯著性差異(F=33.34,P<0.001)。免疫印記法結(jié)果與免疫組化結(jié)果一致
7、,PTEN蛋白的表達(dá)量與子宮內(nèi)膜癌組織病理分級(jí)有關(guān)(F=31.38,P<0.001),與手術(shù)病理分期及肌層浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)(F=1.893,P=0.167)。 (三)P13K蛋白在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌及癌前病變中的表達(dá)免疫組化結(jié)果顯示P13K蛋白分布于細(xì)胞質(zhì)中,在良性子宮內(nèi)膜組織中低表達(dá),在子宮內(nèi)膜癌及非典型增生組織中高表達(dá),三者比較有顯著性差異(F=56.31,P<0.001)。免疫印記法結(jié)果與免疫組化結(jié)果一致,P13K蛋白的
8、表達(dá)量與子宮內(nèi)膜癌組織病理分級(jí)有關(guān)(F=32.30,P<0.001),與手術(shù)病理分期及肌層浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)(P>0.05)。 (四)Livin、PTEN、P13K在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)的相關(guān)性相關(guān)分析表明,livinα和livinβ蛋白表達(dá)與PIEN的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(livinα:r=-0.748,P<0.001;livinβ:r=-0.721,P<0.001)。PTEN蛋白表達(dá)與P13K蛋白表達(dá)也呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.711,
9、P<0.001)。 結(jié)論: 1.livin在子宮內(nèi)膜癌及子宮內(nèi)膜非典型增生組織中高表達(dá),且與子宮內(nèi)膜癌的組織病理分級(jí)關(guān)系密切,可作為子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后評(píng)價(jià)指標(biāo)。livinβ在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用比livinα更為重要。 2.PTEN在子宮內(nèi)膜非典型增生組織中即表達(dá)減弱或缺失,其表達(dá)水平與子宮內(nèi)膜癌組織病理學(xué)分級(jí)關(guān)系密切,推測(cè)PTEN的缺失是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的早期事件,PTEN可以作為子宮內(nèi)膜癌篩查指標(biāo)。
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