檳榔堿的合成及毒性與藥理藥效初步評(píng)價(jià).pdf

1、檳榔堿是中藥檳榔中最具生物活性的成分之一,具有驅(qū)蟲(chóng)、促進(jìn)胃腸平滑肌運(yùn)動(dòng)、抗病原微生物等作用.在獸醫(yī)臨床上,檳榔堿主要用于治療動(dòng)物的絳蟲(chóng)感染.本品(檳榔堿)主要從植物中提取獲得,然而其天然產(chǎn)物含量只有0.1﹪～O.6﹪,再加上藥材來(lái)源有限,傳統(tǒng)方法提取率低,從而大大限制了其在臨床上的應(yīng)用. 本實(shí)驗(yàn)對(duì)檳榔堿的化學(xué)合成工藝進(jìn)行了研究,對(duì)原有工藝進(jìn)行了優(yōu)化改進(jìn).新工藝采用煙酸經(jīng)過(guò)酯化反應(yīng)生成煙酸甲酯,然后經(jīng)過(guò)N-甲基化生成碘化煙酸甲酯N

2、-甲基銨鹽,再經(jīng)液化硼氫化鈉還原生成檳榔堿,其和適量的氫溴酸反應(yīng)放于40℃～50℃蒸干,用無(wú)水乙醇重結(jié)晶得到氫溴酸檳榔堿.新工藝不僅收率高、產(chǎn)物簡(jiǎn)單、易純化、操作簡(jiǎn)便、而且容易轉(zhuǎn)化為工業(yè)生產(chǎn).在實(shí)驗(yàn)第三步一還原反應(yīng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),溶解液比例、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、還原劑的質(zhì)量,這四個(gè)因素的變化會(huì)對(duì)合成收率產(chǎn)生影響.為了尋求最優(yōu)的生產(chǎn)條件以提高收率,對(duì)這四個(gè)因素利用正交法設(shè)計(jì)試驗(yàn).四因素三水平共進(jìn)行九次試驗(yàn)即L<,9>(3<'4>).對(duì)九次試

3、驗(yàn)結(jié)果用極差法和方差法進(jìn)行分析,得出新工藝第三步的最佳條件為乙醇濃度(43﹪)、反應(yīng)溫度(0℃～3℃)、反應(yīng)時(shí)間(10小時(shí))、還原劑的質(zhì)量[還原劑/鯰鹽(反應(yīng)物)=0.333]其合成收率可達(dá)到78.11﹪以上. 利用薄層層析法(TLC)對(duì)氫溴酸檳榔堿進(jìn)行初步鑒定,結(jié)果顯示在離薄層層析板原點(diǎn)同一水平處出現(xiàn)兩個(gè)桔紅色的點(diǎn),再結(jié)合樣品的熔點(diǎn)測(cè)定結(jié)果168℃～170℃(文獻(xiàn)值為169℃～171℃),從而初步判定合成物質(zhì)為氫溴酸檳榔堿.重

4、結(jié)晶后,利用高相液相對(duì)合成的氫溴酸檳榔堿進(jìn)行含量測(cè)定,結(jié)果顯示經(jīng)過(guò)重結(jié)晶之后的氫溴酸檳榔堿的含量可達(dá)98.91﹪以上.進(jìn)一步精制之后對(duì)氫溴酸檳榔堿的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定,紫外光譜、紅外光譜、核磁共振氫譜、核磁共振碳譜鑒定結(jié)果顯示與標(biāo)準(zhǔn)品一致. 對(duì)檳榔堿及氫溴酸檳榔堿毒理學(xué)進(jìn)行初步評(píng)價(jià),根據(jù)寇氏法計(jì)算小鼠口服檳榔堿LD<,50>為174.71mg/kg.Bw,其可信區(qū)間為145.22～210.14mg/kg.BW;小鼠口服氫溴酸檳榔堿(以

5、檳榔堿計(jì)算)LD<,50>為454.38mg/kg.Bw,其可信區(qū)間為422.26～488.95 mg/kg.Bw.對(duì)氫溴酸檳榔堿對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)影響進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)氫溴酸檳榔堿能促進(jìn)小鼠小腸的推進(jìn)率,能興奮家兔小腸平滑肌和豚鼠的胃體肌條,增加胃腸道平滑肌的張力和振幅.對(duì)其藥效學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià),以氫溴酸檳榔堿為主要成分組方制成相應(yīng)的制劑,對(duì)其驅(qū)蟲(chóng)效果進(jìn)行實(shí)驗(yàn).對(duì)50份犬糞樣進(jìn)行檢查,9例查出有犬復(fù)孔絳蟲(chóng)卵,按2.5mg/kgBW劑量給藥兩次,記錄癥