上皮性卵巢癌病人血清和腫瘤組織中KLK6、KLK8的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：卵巢癌是婦科死亡率最高的惡性腫瘤，其發(fā)病隱匿，進(jìn)展迅速，70％～80％的卵巢癌病人發(fā)現(xiàn)時(shí)已為晚期，其5年生存率僅為20％～30％，主要原因是早期卵巢癌沒有癥狀，病人難以早期就診，因此上皮性卵巢癌的早期診斷成為丞待解決的課題。本研究通過檢測(cè)激肽釋放酶基因6(Kallikrein Gene 6，KLK6)、激肽釋放酶基因8(KallikreinGene 8，KLK8)在上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌組織中及血清中的表達(dá)水平

2、，探討KLK6、KLK8在卵巢癌發(fā)生和侵襲中的作用，以及作為腫瘤標(biāo)記物，與CA125比較，用于卵巢癌早期診斷及術(shù)后隨訪的價(jià)值，為卵巢癌的藥物治療提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：1 免疫組織化法檢測(cè)上皮性卵巢腫瘤組織中KLK6、KLK8蛋白的表達(dá)水平，其中良性卵巢腫瘤20例、交界性卵巢腫瘤11例、卵巢癌62例(漿液性囊腺癌33例，粘液性囊腺癌18例，子宮內(nèi)膜樣腺癌11例)并用計(jì)算機(jī)病理圖像分析系統(tǒng)測(cè)量其灰度值(A值)，計(jì)算平均值進(jìn)行半

3、定量分析。 2、比較上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌KLK6、KLK8陽(yáng)性表達(dá)情況，以及KLK6及KLK8在卵巢癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率與不同臨床病理特征的關(guān)系。 3、酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA)雙抗體夾心法檢測(cè)血清激肽釋放酶6(Human Kallikrein 6，hK6)、激肽釋放酶8(Human Kallikrein 8，hK8)濃度，各組血清

4、CA125濃度均由本院實(shí)驗(yàn)室采用電化學(xué)發(fā)光法常規(guī)測(cè)得。 4、比較上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌病人血hK6、hK8、CA125水平。分析卵巢癌組織中KLK6、KLK8表達(dá)的A值與血清濃度值之間的相關(guān)性。 5、根據(jù)文獻(xiàn)給定的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，比較血清hK6、hK8、CA125檢測(cè)用于卵巢癌診斷的敏感度及特異度。 6、應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有計(jì)量資料數(shù)據(jù)均以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，均

5、數(shù)的比較采用單因素方差分析，組間均數(shù)兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用x 2檢驗(yàn)，不同組織學(xué)類型、臨床分期及病理分級(jí)表達(dá)陽(yáng)性率的比較采用x 2檢驗(yàn)和Fisher精確概率法，卵巢癌組織中A值與血清濃度值之間的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：1 KLK6在上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌病人的組織中表達(dá)陽(yáng)性率分別為15％(3/20)、63.6％(7/11)及61.3％(

6、38/62)，良性卵巢腫瘤組陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于后兩組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，后兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在卵巢漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宮內(nèi)膜樣癌中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為78.8％(26/33)、44.4％(8/18)、36.4％(4/11)，漿液性囊腺癌癌組分別與后兩者比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而后兩者間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，)；早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)組織中表達(dá)陽(yáng)性率(4

7、1.7％)，明顯低于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)組織中表達(dá)陽(yáng)性率(73.1％)(P<0.05)；高分化者陽(yáng)性率為40％(8/20)，明顯低于中、低分化者陽(yáng)性率71.4％(30/42)(P<0.05)。 2、KLK8在上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌病人的組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為25％(5/20)、27.3％(3/11)及66.1％(41/62)，卵巢癌組陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于前兩組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，前兩組比較，

8、差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在卵巢漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宮內(nèi)膜樣癌中，陽(yáng)性表達(dá)率分別為87.9％(29/33)、50％(9/18)、27.3％(3/11)，前者分別與后兩者比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而后兩者間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>70.05)；早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)陽(yáng)性表達(dá)率為83.3％(20/24)，明顯高于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)陽(yáng)性表達(dá)率55.3％(21/38)(P<0.05)；高分化者陽(yáng)性表達(dá)率

9、為85％(17/20)，明顯高于中、低分化者陽(yáng)性表達(dá)率57.1％(24/42)(P<0.05)。 3、在上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌病人的血清中，hK6的表達(dá)水平分別為3.24±0.19、3.88±0.22、4.49±0.19(μg/L)；hK8表達(dá)水平分別為4.26±0.29、5.26±0.46、6.59±0.15(μg/L)；CA125表達(dá)水平分別為18.58±16.45、36.22±15.24、146.78±

10、110.62，KLK6、KLK8、CA125表達(dá)水平在三組間均有差別，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)兩兩比較，KLK6在卵巢良性腫瘤組表達(dá)水平均低于后兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)，后兩組比較，卵巢癌組表達(dá)水平高于交界性卵巢腫瘤組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；KLK8卵巢癌組表達(dá)水平均高于前兩組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩者均P<0.01)，前兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0

11、.05)；CA125在良性腫瘤組表達(dá)水平均低于后兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，后兩組比較，卵巢癌組表達(dá)水平高于交界性卵巢腫瘤組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4、卵巢癌組織中KLK6、KLK8表達(dá)的A值分別為145.2±11.3、156.4±14.7，與血清濃度值之間均呈顯著正相關(guān)關(guān)系，Spearman等級(jí)相關(guān)系數(shù)分別為0.31(P<0.05)、0.608(P<0.001)。 5、根據(jù)給定的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，hK

12、6、hK8、CA125用于卵巢癌診斷的敏感度分別為66.1％、61.3％、69.4％，特異度分別為83.9％、77.4％、69.4％，三者敏感度和特異度比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：1 卵巢癌組織及血清中存在KLK6、KLK8蛋白表達(dá)升高。二者蛋白表達(dá)的改變與卵巢癌臨床病理分期和惡性度有關(guān)，可作為一項(xiàng)監(jiān)測(cè)卵巢癌病人預(yù)后的指標(biāo)。在卵巢癌的進(jìn)展過程中，KLK6表達(dá)升高，提示預(yù)后不佳，KLK8表達(dá)升高，提示預(yù)后良好