解脲脲原體對雌性BALB-c小鼠下生殖道的致病性研究.pdf

1、解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum，Uu)是支原體科、脲原體屬中主要微生物之一，可分為2個生物群(Parvo和T960群)，14個血清型(1～14血清型)和5個基因型。Uu是女性泌尿生殖道的常見微生物，目前對于Uu在女性下生殖道的致病性尚存在爭議，有學(xué)者認(rèn)為Uu在女性下生殖道有一定致病能力，而部分學(xué)者卻認(rèn)為Uu是女性下生殖道的寄生菌，也有研究認(rèn)為Uu的致病角色和寄生狀態(tài)可相互轉(zhuǎn)化。隨著對其致病性深入研究，發(fā)現(xiàn)Uu的

2、不同生物群之間致病性存在差異，亦有文獻(xiàn)報(bào)道不同血清型/基因型的Uu在人類泌尿生殖道的致病性可能不同。目前國內(nèi)外報(bào)道的Uu感染動物模型主要用于探討單一血清型Uu的致病能力及個別不同血清型之間的致病性差異比較，尚沒有多種不同血清型Uu之間致病性差異比較的動物模型資料。
　　 研究目的：
　　 1建立雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu5個血清型(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8)感染動物模型。
　　 2從細(xì)胞因子和

3、組織病理學(xué)變化的角度初步評價(jià)5個血清型Uu對BALB/c雌性小鼠下生殖道的致病性。
　　 研究方法：
　　 1.Uu菌株：Uu標(biāo)準(zhǔn)株1(ATCC27813)，3(ATCC27815)，4(ATCC27816)，6(ATCC27818)和8(ATCC21618)，調(diào)定CCU為1×106 CCU/ml。
　　 2.雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu感染模型的建立：將35只小鼠隨機(jī)分為7組(空白組，雌二醇組和5組感染組)

4、，除空白組外其余小鼠均接受雌二醇處理，每周一次，第二次注射雌二醇后將Uu標(biāo)準(zhǔn)菌株接種于感染組小鼠下生殖道，于接種前、接種后第7天和第14天對小鼠下生殖道Uu進(jìn)行培養(yǎng)鑒定及PCR檢測，在后兩次Uu培養(yǎng)鑒定的同時對Uu進(jìn)行CCU測定。
　　 3.雌性BALB/c小鼠下生殖道TNF-α檢測：在接種當(dāng)天、接種后第7天和第14天對小鼠下生殖道TNF-α進(jìn)行檢測。
　　 4.雌性BALB/c小鼠下生殖道病理學(xué)檢查：在Uu接種后第14

5、天將所有小鼠處死，取陰道宮頸組織行HE染色進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。
　　 研究結(jié)果：
　　 1.雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu感染模型的建立情況：所有小鼠在接種Uu菌液前下生殖道Uu培養(yǎng)及PCR檢測均為陰性；5組感染組所有小鼠在接種Uu后第7天和第14天下生殖道Uu培養(yǎng)及PCR檢測均陽性，Uu培養(yǎng)陽性的濃度波動在101～107ccu/ml之間；空白組和雌二醇組所有小鼠在實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)中下生殖道Uu培養(yǎng)及PCR檢測均陰性。

6、>　　 2.雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu感染后的下生殖道的形態(tài)學(xué)改變：空白對照組和單純雌二醇組，均未發(fā)現(xiàn)小鼠陰道分泌物增多，陰道口周圍無脫毛、淺表糜爛；而5組感染組(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8)中部分小鼠出現(xiàn)陰道分泌物增多(3/5、5/5、5/5、2/5、4/5)；陰道口周圍出現(xiàn)脫毛、淺表糜爛(2/5、3/5、3/5、1/5、3/5)。
　　 3.雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu感染后陰道灌洗液TNF-α改變情

7、況：3.1不同組間TNF-α水平的差異比較
　　 空白組，雌二醇組和5組感染組(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8)小鼠下生殖道的TNF-α平均值分別為：3.79，4.33，94.92，77.47，107.36，91.94，87.15pg/ml。5組感染組TNF-α水平均明顯高于空白組和雌二醇組，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值均＜0.05)。3.2不同時間之間TNF-α水平的差異比較
　　 空白組和雌二醇組2組小鼠下生殖道三個

8、時間點(diǎn)TNF-α的平均值分別為：4.01，4.34，3.02和4.82，4.33，3.85 pg/ml?？瞻捉M、雌二醇組各組的TNF-α水平在三個時間點(diǎn)間無明顯差異(P值均＞0.05)。
　　 在雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu感染的5組感染組當(dāng)中，感染后的第7天下生殖道TNF-α水平均明顯高于第1天和第14天(P值均＜0.05)。3.3同一個時間點(diǎn)上不同組間TNF-α水平的比較
　　 第0天：空白組，雌二醇組和5組感染

9、組(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8)小鼠下生殖道的TNF-α平均值分別為：4.01，4.82，3.99，5.08，4.03，4.46，4.76 pg/ml。各個組間TNF-α水平無明顯差異(P=0.331)。
　　 第7天：空白組，雌二醇組和5組感染組(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8)小鼠下生殖道的TNF-α平均值分別為：4.34，4.33，262.10，203.30，296.66，250.01，232.61 p

10、g/ml。5組感染組TNF-α水平均高于空白組、雌二醇組，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值均＜0.05)。
　　 Uu4＞Uu1＞Uu6＞Uu8＞Uu3＞空白組＞雌二醇組
　　 第14天：空白組，雌二醇組和5組感染組(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8)小鼠下生殖道的TNF-α平均值分別為：3.02，3.85，18.68，24.02，21.40，21.36，24.08pg/ml。5組感染組TNF-α水平均高于空白組、雌二醇組，且

11、有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值均＜0.05)。
　　 Uu8＞Uu3＞Uu4＞Uu6＞Uu1＞雌二醇組＞空白組。
　　 4.病理學(xué)結(jié)果：空白組和雌二醇組小鼠下生殖道組織病理無明顯變化，而在雌性BALB/c小鼠下生殖道Uu感染的5組感染組小鼠下生殖道的組織中，均表現(xiàn)為在陰道組織間質(zhì)中多形核白細(xì)胞浸潤。
　　 研究結(jié)論：
　　 1.成功建立雌性BALB/c小鼠下生殖道5個血清型Uu(Uu1、Uu3、Uu4、Uu6、Uu8