肺炎支原體感染對(duì)BALB-c小鼠和哮喘BALB-c小鼠肺組織CysLTs及其受體表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　肺炎支原體是人呼吸道感染中重要的病原微生物之一，流行病學(xué)及一些臨床研究提示，肺炎支原體感染同哮喘的發(fā)作關(guān)系密切。肺炎支原體感染可以誘發(fā)哮喘發(fā)作或使得慢性哮喘持續(xù)存在。哮喘的發(fā)作同多種因素有關(guān)，例如接觸致敏原、吸入冷空氣、呼吸道感染等。其中呼吸道感染同哮喘的發(fā)作關(guān)系極為密切。白三烯介導(dǎo)的氣道慢性炎癥是哮喘發(fā)病中重要機(jī)制，與哮喘的發(fā)生和發(fā)展有密切的關(guān)系。一些臨床研究表明，肺炎支原體肺炎患兒血、尿中白三烯水平明顯升高，但是相

2、關(guān)的基礎(chǔ)研究較少。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)正常小鼠和哮喘小鼠感染肺炎支原體后，肺組織中白三烯及其受體表達(dá)的變化，探討肺炎支原體感染是否可通過(guò)白三烯途徑參與哮喘的發(fā)病機(jī)制，為肺炎支原體感染與哮喘發(fā)病的關(guān)系奠定理論依據(jù)。
　　方法：
　　144只SPF級(jí)BALB/c小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、肺炎支原體感染組、哮喘組、哮喘后接種肺炎支原體組。用培育好的肺炎支原體鼻腔接種小鼠，建立肺炎支原體感染小鼠模型;卵蛋白腹腔注射并4％卵蛋白霧化

3、激發(fā)，建立小鼠急性哮喘模型;正常對(duì)照組以磷酸鹽緩沖溶液(PBS)代替肺炎支原體及卵蛋白的霧化和激發(fā)。分別于模型制作完成后第3、7、14、21、30天取材。對(duì)各組小鼠肺組織石蠟包埋切片后行HE染色觀察病例變化;ELISA法檢測(cè)各組支氣管肺泡灌洗液中CysLTs的含量;免疫組化及Western-blot法檢測(cè)各組小鼠肺組織CysLTs-R蛋白表達(dá)的情況。
　　結(jié)果：
　　1、病理學(xué)改變:哮喘組炎癥反應(yīng)最明顯，出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)

4、，肺間隔增寬;肺炎支原體(MP)感染組于第7天和14天炎癥反應(yīng)最明顯。2、肺組織CysLTs-R蛋白的表達(dá):CysLTs-R主要表達(dá)在各級(jí)支氣管（細(xì)支氣管、終末細(xì)支氣管、呼吸性細(xì)支氣管）上皮細(xì)胞中表達(dá);于光鏡下觀察可看到肺炎支原體感染組、哮喘(OVA)組及哮喘后支原體感染(OVA-MP)組CysLTs-R含量的的表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組;其中OVA+MP組的表達(dá)高于OVA組。3、ELISA檢測(cè)小鼠BALF中CysLTs含量:MP感染組BA

5、LB/c小鼠BALF中CysLTs含量較正常對(duì)照組明顯增高，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中小鼠感染MP后CysLTs含量在第7、14天達(dá)到高峰，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;OVA+MP組較OVA組小鼠BALF中CysLTs水平明顯增高，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、Western-blot法檢測(cè)小鼠肺組織CysLTs-R的表達(dá):MP感染組的CysLTs-R均較正常對(duì)照組表達(dá)強(qiáng)度增加，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Cys