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文檔簡介
1、目的:檢測先天性肌性斜頸(CMT)病變組織中鈣蛋白酶-1、泛素和20S蛋白酶體的表達(dá);探討CMT病變組織中萎縮肌纖維蛋白降解的機(jī)制以及了解其與間質(zhì)纖維化的關(guān)系;為深入研究CMT胸鎖乳突肌間質(zhì)增生及調(diào)節(jié)肌纖維萎縮的影響因子,以及抑制間質(zhì)增生和肌纖維萎縮,從而為治療CMT探討新的線索和增添理論依據(jù)。
方法:根據(jù)隨機(jī)原則并按年齡分層抽樣,從188例CMT手術(shù)患兒(男123例,女65例,年齡3個月~16歲,平均年齡2.9歲)中選取
2、40例不同年齡段的CMT患兒作為CMT組。按年齡將CMT組分為4組,每組10例患兒,即4月~6月組(平均年齡4.9個月),7月~12月組(平均年齡9.2個月),1歲~3歲組(平均年齡2.3歲),4歲~16歲組(平均年齡11.1歲)。選取1例腦癱和4例發(fā)育性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良的內(nèi)收肌作為對照組(男2例,女3例,年齡1歲~7歲,平均年齡3.2歲)。對手術(shù)切除的病理組織行HE染色、Masson膠原染色,免疫組織化學(xué)法檢測鈣蛋白酶-1、泛素和20S
3、蛋白酶體的表達(dá),對間質(zhì)纖維化程度和免疫組化中強(qiáng)陽性肌細(xì)胞數(shù)進(jìn)行判定。
結(jié)果:HE染色、Masson膠原染色顯示,CMT組均可觀察到萎縮的肌纖維及間質(zhì)纖維化,其中29例標(biāo)本可觀察到增生的脂肪細(xì)胞。免疫組化結(jié)果顯示,在對照組中,鈣蛋白酶-1、泛素和20S蛋白酶體主要位于肌纖維胞漿,染色均勻,表達(dá)強(qiáng)度為陰性至中等陽性。與對照組相比,CMT組中萎縮肌纖維鈣蛋白酶-1、泛素與20S蛋白酶體的表達(dá)明顯增加,在間質(zhì)增生與纖維化嚴(yán)重的區(qū)域
4、,可觀察到強(qiáng)陽性肌細(xì)胞數(shù)明顯增加。CMT組中鈣蛋白酶-1的強(qiáng)陽性肌細(xì)胞數(shù)百分比為40.7%±13.8%,明顯高于對照組的0.52%±0.54%(P<0.01);并與間質(zhì)纖維化程度呈正相關(guān)(r=0.750,P<0.01)。CMT組中泛素和20S蛋白酶體的強(qiáng)陽性肌細(xì)胞數(shù)百分比分別為43.7%±14.7%和32.4%±12.5%,亦明顯高于對照組的1.1%±0.63%和0.62%±0.40%(P<0.01);并與間質(zhì)纖維化程度呈正相關(guān)(泛素r
5、=0.758,P<0.01,蛋白酶體r=0.571,P<0.01)。觀察標(biāo)本連續(xù)切片,發(fā)現(xiàn)CMT組中鈣蛋白酶-1、泛素和20S蛋白酶體均在同一萎縮肌纖維中有明顯表達(dá),其中鈣蛋白酶-1與泛素表達(dá)程度呈正相關(guān)(r=0.956,P<0.01),泛素與20S蛋白酶體表達(dá)程度呈正相關(guān)(r=0.786,P<0.01)
結(jié)論:本研究在國內(nèi)外首次觀察到CMT病變組織中萎縮肌纖維鈣蛋白酶-1、泛素和20S蛋白酶體的強(qiáng)陽性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示鈣
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