青天葵化學(xué)成分及其抗腫瘤作用的研究.pdf

1、目前，腫瘤嚴(yán)重危害著人類(lèi)健康，從天然植物中尋找安全、有效的抗腫瘤藥物，在世界上已經(jīng)成為抗腫瘤藥物研究的一個(gè)重要組成部分。 青天葵來(lái)源于蘭科植物毛唇芋蘭Nerviliae Fordii(Hance)Schltr的地下塊莖和全草。具有潤(rùn)肺止咳，清熱解毒，散淤止痛等作用。主治肺癆咯血，肺熱咳嗽，口腔炎，咽喉腫痛，瘡瘍腫毒，跌打損傷。在現(xiàn)代研究中，青天葵對(duì)治療鼻咽癌有一定的緩解作用。但青天葵化學(xué)成分及藥理研究未見(jiàn)報(bào)道，其抗癌作用是否可靠

2、尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。 化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明，青天葵主要含三萜、甾體、有機(jī)酸、氨基酸、黃酮等成分。 本課題首次對(duì)青天葵進(jìn)行醇提和部位分離，對(duì)其石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和甲醇提取物采用MTT法測(cè)定了它們各自對(duì)白血病細(xì)胞株L1210和P388D1、宮頸癌細(xì)胞株Hela、人胃癌細(xì)胞株SGC7901、黑色素瘤細(xì)胞株B16、神經(jīng)性腫瘤細(xì)胞株NG108-15、人肝癌細(xì)胞株Hele7404的生長(zhǎng)抑制情況。結(jié)果表明，青天葵

3、石油醚提取物和乙酸乙酯提取物具有一定的體外抗腫瘤作用。對(duì)體外初步篩選出的活性部位，進(jìn)行了小鼠最大耐受量(MTD)試驗(yàn)，用藥前后，小鼠無(wú)異常表現(xiàn)，小鼠對(duì)石油醚提取物的最大耐受量為18.0g／kg，對(duì)乙酸乙酯提取物的最大耐受量為14.4g／kg。對(duì)體外初步篩選出的活性部位，又利用S<，180>和H<，22>小鼠模型進(jìn)行了體內(nèi)抗腫瘤試驗(yàn)。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，石油醚提取物和乙酸乙酯提取物對(duì)小鼠移植性肉瘤S<，180>和小鼠肝癌H22均有明顯的抑瘤

4、活性，并且對(duì)H<，22>荷瘤小鼠可延長(zhǎng)其生存期。它們也能改善小鼠的免疫機(jī)能。 對(duì)體外體內(nèi)篩選出的活性部位，采用柱色譜方法進(jìn)一步進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分分離和純化，對(duì)純凈的化合物利用熔點(diǎn)測(cè)定、UV、IR、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。本課題首次從青天葵石油醚提取物和乙酸乙酯提取物分離得到12個(gè)化合物，鑒定了其中11個(gè)化合物，它們分別為：Cyclohomonervilol(Ⅰ)、二十八烷酸(Octacosan

5、oic a c i d，Ⅱ)、豆甾醇(Stigmasterol，Ⅲ)、Cyclohomonervilol-(E)-p-hydroxy cinnamate(Ⅳ)、24(R／a)-dihydrocycloeucalenol-(E)-p-hydroxy cinnamate(V)、十六烷酸(Doeosanoic acid，Ⅵ)、24(S/β)-dihydrocycloeucalen01-(E)-p-hydroxy cinnamate(Ⅷ)、山奈

6、酚-7-甲醚(Kaempferol-7-methyl ether，IX)、槲皮素-7，3’-二甲醚(quercetin一7，3＇－dimetＨylether，X)、β-胡蘿卜苷(β-daucosterol，Ⅺ)、正亮氨酸(Norleucine，XII)。 本課題首次對(duì)分離出的山奈酚-7-甲醚和槲皮素-7，3＇-二甲醚進(jìn)行了體外抗腫瘤試驗(yàn)，采用MTT法測(cè)定了它們各自對(duì)白血病細(xì)胞株L1210和P388D1、宮頸癌細(xì)胞株Hela、人胃

7、癌細(xì)胞株SGC7901、黑色素瘤細(xì)胞株B16、神經(jīng)性腫瘤細(xì)胞株NG108-15、人肝癌細(xì)胞株Hele7404的生長(zhǎng)抑制情況。結(jié)果表明，山奈酚-7-甲醚具有一定的體外抗腫瘤作用，因而初步確定山奈酚-7-甲醚為青天葵抗腫瘤的活性成分之一。但槲皮素-7，3＇-二甲醚基本無(wú)抗腫瘤作用。 本課題首次采用HPLC方法測(cè)定了山奈酚-7-甲醚和槲皮素-7，3＇-二甲醚在青天葵藥材中的含量。結(jié)果表明，山奈酚-7-甲醚在青天葵中的含量為0.0787

8、％，槲皮素-7，3＇-二甲醚在青天葵中的含量為1.1198％ 本課題首次確定了青天葵的石油醚提取物和乙酸乙酯提取物具有抗腫瘤作用，并從中分離鑒定了11個(gè)化合物，同時(shí)初步揭示了山奈酚-7-甲醚為青天葵抗腫瘤的活性成分之一。本課題對(duì)有活性的山奈酚-7-甲醚及量比較大的槲皮素-7，3＇-二甲醚進(jìn)行了含量測(cè)定。本課題為最終揭示青天葵抗腫瘤作用及其物質(zhì)基礎(chǔ)，建立藥材質(zhì)量的科學(xué)評(píng)價(jià)方法，實(shí)現(xiàn)藥材可持續(xù)開(kāi)發(fā)利用及抗腫瘤中藥新藥開(kāi)發(fā)提供了科學(xué)依