游離棉酚及其代謝產(chǎn)物棉酚酮在動物體內(nèi)殘留和組織分布研究.pdf

1、目的：1.本實驗通過對實驗大鼠、鯽魚、雞喂食含有棉酚的自制棉籽飼料，模擬動物進食過程，實驗周期內(nèi)定期取實驗動物各組織、器官，建立 HPLC檢測實驗樣品中游離棉酚及其代謝產(chǎn)物（棉酚酮）殘留的方法。并采用高靈敏度的UPLC-MS/MS分析游離棉酚及其代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)的組織分布。2.建立牛乳中游離棉酚及其旋光異構(gòu)體的HPLC檢測方法。并根據(jù)上述方法對市售的動物源性食品進行游離棉酚及其代謝產(chǎn)物殘留的檢測。
　　方法：1.用自制的含定量棉

2、酚的棉籽飼料飼養(yǎng)實驗動物一定周期，定期取實驗動物各組織器官（心、肝、脾、肺、腎、肉、血漿），將各樣品勻漿，加入提取劑（0.2％甲酸乙腈溶液）及甘草次酸內(nèi)標(biāo)液，經(jīng)除蛋白、離心等前處理方法后，采用HPLC及UPLC-MS/MS法確定動物體內(nèi)各個組織器官中游離棉酚及其代謝產(chǎn)物的殘留和組織分布。2.采用以（R）-（-）-2-胺基-1-丙醇為手性拆分試劑、甘草次酸為內(nèi)標(biāo)物的柱前衍生高效液相色譜法，對牛乳中游離棉酚及其旋光異構(gòu)體含量進行檢測。

3、>　　結(jié)果：1.HPLC及UPLC-MS/MS測定動物體內(nèi)游離棉酚及其代謝產(chǎn)物的分析方法良好。HPLC法測定大鼠和雞體內(nèi)各組織器官中游離棉酚及棉酚酮的線性范圍為0.5-20μg/mL，鯽魚為0.1-10μg/mL，檢出限0.03μg/mL。UPLC-MS/MS法檢測大鼠體內(nèi)各組織器官中游離棉酚及棉酚酮的線性范圍均為0.01-10μg/mL，檢出限為0.002μg/mL。UPLC-MS/MS分析表明大鼠體內(nèi)游離棉酚及棉酚酮的含量隨飼養(yǎng)時間

4、延長而蓄積增加，體內(nèi)棉酚含量依次為：肝臟、血漿、脾臟、肺臟、心臟、睪丸（雄性）、腎臟、肌肉，且肝臟中蓄積最多，動物體內(nèi)代謝物棉酚酮僅在肝臟中發(fā)現(xiàn)。通過對雌、雄大鼠進行對比分析，結(jié)果顯示棉酚在雌性大鼠體內(nèi)的蓄積更高。2.牛乳中棉酚及其旋光異構(gòu)體濃度線性范圍均為2-10μg/mL。3.運用所建立的檢測方法，對市售動物源性食品中游離棉酚及其代謝產(chǎn)物進行檢測，包括魚、雞、豬、羊（肝、肉）共58份樣品，檢出率為51.7%。
　　結(jié)論：本研究