棉酚分解菌的分離鑒定及其特性研究.pdf

1、棉花是新疆的主要經(jīng)濟(jì)作物，資料得知，新疆地區(qū)的種植面積達(dá)到3151萬(wàn)畝（2015年），農(nóng)作物秸稈的產(chǎn)量已超出7億噸（2015年），其中棉花秸稈產(chǎn)量達(dá)650萬(wàn)噸（2012年）。棉花秸稈是一種產(chǎn)量巨大，蛋白質(zhì)和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量較高的可再生植物蛋白飼料資源。但由于棉花全株包含著對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖有潛在危害的有毒物質(zhì)─游離棉酚,從而限制了棉花秸稈做原料生產(chǎn)青貯飼料或棉籽油加工過(guò)程中的沉淀物─棉籽油泥作為飼料添加劑方面的利用價(jià)值,造成飼料資源的浪費(fèi)問(wèn)

2、題。目前，在國(guó)內(nèi)外降解有毒棉酚的方法有物理法，化學(xué)法和生物發(fā)酵法。雖然物理化學(xué)脫毒法對(duì)棉籽粕的解毒起到了一定作用，但處理當(dāng)中也存在于成本高，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)易破壞等一些缺點(diǎn)。生物發(fā)酵法來(lái)降解棉酚是當(dāng)前最安全，脫毒效果最好，生產(chǎn)成本低的脫毒方法。不僅可使棉花秸稈，棉籽油和棉籽油泥脫毒，同時(shí)可提高它們?cè)陲暳仙系睦玫确矫嬗芯薮蟮膽?yīng)用價(jià)值。
　　1.本研究從棉花秸稈中共分離出14種菌株，通過(guò)以醋酸棉酚為唯一碳源培養(yǎng)基平板劃線來(lái)分離篩選出6株具有

3、分解棉酚能力的菌株，編號(hào)分別為A1、A2、A4、B1、B2、B9。為了進(jìn)一步篩選出具有較高的分解棉酚能力的菌株，對(duì)其進(jìn)行復(fù)篩。試驗(yàn)結(jié)果表明，菌株B1和B9在棉酚濃度不同的以醋酸棉酚為唯一碳源的固體平板上生長(zhǎng)較快且好。從NA平板上菌落形態(tài)觀察結(jié)果顯示：B1菌落正反面顏色一致、圓形、邊緣不整齊、乳白色、表面有褶皺、表面濕潤(rùn)、中心稍隆起、透明；B1菌體細(xì)胞長(zhǎng)約1.27～2.30μm，桿狀、著色均勻、能夠產(chǎn)生橢圓形芽孢、革蘭氏陽(yáng)性。B9菌落圓形

4、、淡黃色、邊緣不整齊、不透明、中間凸起如脊?fàn)睿籅9菌體細(xì)胞長(zhǎng)約1.26～2.69μm，著色均勻、長(zhǎng)桿狀、革蘭氏陽(yáng)性。根據(jù)一些形態(tài)特征初步鑒定為芽胞桿菌。利用Biolog微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)來(lái)對(duì)其進(jìn)行鑒定，結(jié)果表明，菌株B1和B9都屬于芽胞桿菌屬，種名分別為死谷芽孢桿菌（Bacillus vallismortis）和漠海威芽孢桿菌（Bacillus mojavensis）。
　　2.利用高效液相色譜（HPLC）方法來(lái)測(cè)定棉花秸稈、棉籽

5、、棉籽餅、食用棉籽油、未加工的棉籽油和棉籽油泥中的總棉酚和游離棉酚含量。探討吐魯番本地樣品中各個(gè)棉花副產(chǎn)品中棉酚含量，為后續(xù)研究提供參考數(shù)據(jù)。檢驗(yàn)結(jié)果顯示，棉花秸稈中總棉酚和游離棉酚含量分別為0.02％和小于0.8μg/ml，棉籽中總棉酚含量為1.66%和游離棉酚含量為5949.8 mg/kg，棉餅中總棉酚含量為0.68%和游離棉酚含量為159mg/kg，未加工棉籽油中總棉酚含量為2.50%和游離棉酚含量為8033.5 mg/kg，食用

6、棉籽油中總棉酚含量未檢出，游離棉酚含量≤0.25mg/kg，棉籽油泥中總棉酚含量為5.23%，游離棉酚含量為30796.5mg/kg。對(duì)棉籽油和棉籽油泥的脫毒效果試驗(yàn)得知，菌株B1和B9在同樣的接種量和培養(yǎng)溫度下對(duì)棉籽油的脫毒效果有一定的脫毒作用，對(duì)棉籽油的脫毒率分別為21.1%和22.2%。但對(duì)棉籽油泥的脫毒不太理想，需要繼續(xù)研究。
　　3.將為探討棉酚分解菌B1和B9是否可以作為飼料添加劑，棉酚分解菌（B1、B9）與高效飼用乳