膠質(zhì)瘤相關(guān)新基因的研究.pdf

1、第一部分：膠質(zhì)瘤相關(guān)基因的反向多點(diǎn)雜交研究，目的：利用反向多點(diǎn)雜交技術(shù)檢測(cè)膠質(zhì)瘤相關(guān)基因譜在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況，為這些基因在膠質(zhì)瘤惡性進(jìn)展中的作用提供依據(jù)，并找出具有進(jìn)一步研究?jī)r(jià)值的基因。結(jié)論：反向多點(diǎn)雜交可以同時(shí)檢測(cè)數(shù)十個(gè)基因的表達(dá)，并能對(duì)表達(dá)量高低進(jìn)行半定量分析。我們通過(guò)這種方法發(fā)現(xiàn)，我們發(fā)現(xiàn)兩條(A20、eps8)與膠質(zhì)瘤相關(guān)的新基因?！　〉诙糠郑篈20、EPS8、RAD17在膠質(zhì)瘤中表達(dá)的研究，目的：第一部分中我們已經(jīng)利

2、用反向多點(diǎn)雜交技術(shù)篩選到A20、EPS8、RAD17等有研究?jī)r(jià)值的基因。我們利用RT-PCR技術(shù)對(duì)A20、EPS8、RAD17進(jìn)行進(jìn)一步的研究。一方面在更大的樣本范圍內(nèi)明確以上基因的表達(dá)改變情況，另一方面通過(guò)對(duì)這些基因在不同級(jí)別星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤標(biāo)本中表達(dá)水平的半定量分析為進(jìn)一步的功能研究提供依據(jù)。方法：提取6例正常腦組織和16例中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤標(biāo)本的總RNA，并反轉(zhuǎn)錄為cDNA。加入相應(yīng)的引物后PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物電泳后，按預(yù)期產(chǎn)物條帶

3、與內(nèi)參照之間的比值對(duì)相應(yīng)基因的表達(dá)水平進(jìn)行半定量分析。結(jié)果：A20、EPS8、RAD17mRNA在膠質(zhì)瘤中均有不同程度的升高，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其升高趨勢(shì)與反向點(diǎn)雜交結(jié)果相同。結(jié)論：A20、EPS8、RAD17mRNA確實(shí)在膠質(zhì)瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)。同時(shí)也反應(yīng)了反向多點(diǎn)雜交結(jié)果的可靠性?！　〉谌糠郑篍PS8蛋白在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)和意義，目的：EPS8是一種97Kda的蛋白。EPS8蛋白參與并強(qiáng)化具有受體功能的酪氨酸蛋白激酶信號(hào)通路。為證實(shí)E