毛細(xì)管區(qū)帶電泳法分離多種低分子量有機(jī)酸的研究.pdf

1、本文運(yùn)用毛細(xì)管區(qū)帶電泳直接紫外檢測(cè)技術(shù)分離九種低分子量有機(jī)酸，嘗試建立一種簡(jiǎn)單、高效、準(zhǔn)確、穩(wěn)定地測(cè)定低分子量有機(jī)酸成分及含量的方法。通過(guò)對(duì)緩沖液種類、PH值、緩沖液濃度、電滲改性劑、有機(jī)溶劑、溫度，電壓等電泳條件優(yōu)化，確定毛細(xì)管區(qū)帶電泳直接紫外檢測(cè)分離低分子量有機(jī)酸的優(yōu)化條件如下：未涂層的毛細(xì)管50μm×60cm(有效分離長(zhǎng)度50 cm)；分離溫度30℃；分離電壓：12kv；電極：反向；檢測(cè)波長(zhǎng)：200nm；緩沖液：230 mmol·

2、L-1NaH2PO4/115mmol·L-1NazB4O7緩沖溶液(摩爾比2:1，PH7.49)，內(nèi)含電滲流改性劑十四烷基三甲基溴化銨(TTAB，0.5 mmol·L-1)，二次進(jìn)樣之間用運(yùn)行緩沖液沖洗4min。溶液進(jìn)樣前用0.45μm的纖維濾膜過(guò)濾。在此條件下，甲酸、乙酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、酒石酸、乳酸、富馬酸和丁二酸9種有機(jī)酸均能達(dá)到基線分離，分離度均大于1.6。且九種有機(jī)酸的線性范圍較寬，相關(guān)系數(shù)在0.9990～0.9999之

3、間，線性關(guān)系良好；各有機(jī)酸遷移時(shí)間及峰面積的RSD分別在0.1％～0.2％及2.0‰6.0％之間，回收率在94.7％～104.2％，方法具有較好的精密度和準(zhǔn)確度。
　　 將優(yōu)化的檢測(cè)方法應(yīng)用于實(shí)際體系，檢測(cè)丁二酸發(fā)酵體系中有機(jī)酸組份的回收率在95％～102.5％之間；對(duì)樣品平行測(cè)定五份，有機(jī)酸含量RSD均2％～12％之間，說(shuō)明方法具有良好的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性，另外對(duì)整個(gè)發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行了跟蹤監(jiān)測(cè)，丁二酸在發(fā)酵14小時(shí)后已積累11g/L。