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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文雌激素及孕激素對(duì)ER和PR陰性的JEC的影響姓名:徐敬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):免疫學(xué)指導(dǎo)教師:吳中明20040501遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文雌激素及孕激素對(duì)ER和PR陰性的JEC的影響研究生:徐敬導(dǎo)師:吳中明教授摘要目的:探討不同濃度的雌激素(17E2)及孕激素(P)對(duì)雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)陰性的子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系JEC體外生長(zhǎng)和細(xì)胞周期的影響。方法:選用人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系JEC進(jìn)行體外培養(yǎng),
2、加入含不同濃度17pE:及P的培養(yǎng)液,采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)的方法,觀察子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系JEC細(xì)胞的增殖活性和細(xì)胞周期時(shí)相變化;同時(shí)采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色并進(jìn)行圖像分析,檢測(cè)JEC細(xì)胞在加入17BE2及孕激素前后細(xì)胞周期調(diào)控蛋白cyclinA表達(dá)的變化。結(jié)果:(1)細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察細(xì)胞增殖:濃度為10‘7和104mol/L的雌激素作用JEC細(xì)胞4d后,細(xì)胞數(shù)均明顯高于對(duì)照組,而其余濃度E2無(wú)明
3、顯作用。濃度為104、10‘6、lO~、10。8mol/L孕激素作用時(shí),細(xì)胞數(shù)皆明顯低于對(duì)照組,且隨濃度逐漸增加,細(xì)胞數(shù)也逐漸減少。10。9mol/LP對(duì)JEC細(xì)胞無(wú)明顯作用。(2)MTT法觀察細(xì)胞增殖:不同濃度E2作用JEC24h、48h后,其OD值和對(duì)照組相比無(wú)明顯差異;作用72h時(shí),僅lO‘6組OD值較對(duì)照組明顯升高,差異有顯著性。P組顯示,作用24h后其OD值無(wú)明顯變化:48h時(shí)僅104組OD值較對(duì)照組低,差異顯著;72h時(shí)10
4、一、10~、104和10也組OD值均明顯低于對(duì)照組,且差異顯著。(3)流式細(xì)胞二術(shù)對(duì)細(xì)胞周期分析:104mol/L的17BE2作用72h后,可使JEC細(xì)胞中Go/Gl期細(xì)胞由6835%減少為55“%,S期及G2/M期的細(xì)胞由3165%增加到4436%,但作用48h后細(xì)胞周期時(shí)相分布無(wú)明顯變化。104moFL的P作用JEC細(xì)胞48h后,使Go/Gl期的細(xì)胞由6698%增加到7447%,S期及G2/M期的細(xì)胞由3299%減少到2553%:作
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