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文檔簡介
1、 本文第一部分 通過體外擴增MP的P30粘附素基因,構(gòu)建P30基因的原核表達質(zhì)粒,在E.coli中表達并鑒定;用親和層析法分離純化rP30蛋白;以純化的rP30蛋白為抗原建立間接dolt-ELISA法,用臨床病例評價rP30蛋白在MP感染免疫學(xué)診斷中的價值;為探討MP的致病機制和臨床血清學(xué)診斷提供新的依據(jù)。結(jié)果顯示;成功構(gòu)建出原核表達載體pET32a(+)/P30;在E.coli中表達出了完整的MP P30蛋白;rP30蛋白具有
2、良好的抗原性;經(jīng)Ni-NTA樹脂純化后得到較高純度的目的蛋白;此重組蛋白為MP感染檢測用抗原、抗體的選擇及MP感染致病機制的研究奠定了基礎(chǔ)。第二部分通過建立BALB/C小鼠的MP肺部感染模型,探索小鼠急性MP感染的過程。方法:BALB/C小鼠隨機分為Ⅰ、Ⅱ兩組,Ⅰ組在0、1、2天滴鼻接種MP菌液3次,Ⅱ組在0天滴鼻接種小劑量MP菌液1次后于8、9天再接種和Ⅰ組相同的MP菌液2次,均設(shè)立不同劑量、批次的生理鹽水對照組。然后以組織病理學(xué)評分
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