刺參（Stichopus japonicus）體壁膠原蛋白理化性質(zhì)和生物活性研究.pdf

1、刺參(Stichopus japonicus)是一種傳統(tǒng)的滋補(bǔ)佳品，含有多種生物活性物質(zhì)，具有抗凝血、免疫調(diào)節(jié)、降血脂、抗病毒、抗腫瘤等多種藥理作用。刺參體壁蛋白含量的40％以上為膠原蛋白，但是由于它的不溶解性，關(guān)于它的相關(guān)性質(zhì)報(bào)道很少。本文采用胃蛋白酶促溶的方法從刺參體壁中提取膠原蛋白，并研究了它的理化性質(zhì)、對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(．ACE)的抑制活性和體外抗氧化活性。本文的主要工作及結(jié)論如下： (1)β一巰基乙醇、0.05mo1

2、／LNaOH溶液將刺參體壁進(jìn)行預(yù)處理，胃蛋白酶促溶的方法提取膠原蛋白(PSC)。對(duì)實(shí)驗(yàn)中各主要影響因素進(jìn)行了分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以膠原提取率為指標(biāo)，胃蛋白酶提取的最佳條件為：pH2.0，溫度為4℃，底物濃度m(刺參體壁)：m(醋酸溶液)=l：10，加酶量6％，提取時(shí)間為48h。 (2)系統(tǒng)地研究了刺參體壁膠原蛋白的理化性質(zhì)。膠原蛋白為一種糖蛋白，經(jīng)硫酸一苯酚法測(cè)定，其含糖量為2.7％。測(cè)定了產(chǎn)物的紫外圖譜，符合膠原蛋白的特征。從刺

3、參體壁提取的膠原蛋白的氨基酸組成與I型膠原蛋白的氨基酸組成相似。在此基礎(chǔ)上對(duì)其進(jìn)行了SDS—PAGE電泳，胃蛋白酶促溶性膠原蛋白是一種異三聚體的蛋白，推測(cè)由兩條α<,1>鏈和一條α<,2>鏈組成[(α<,1>)<,2>a<,2>]。胃蛋白酶提取的刺參膠原蛋白最大程度地保持了其天然結(jié)構(gòu)。熱變性溫度為24.3℃，刺參獨(dú)特的組織特征與其熱變性溫度有很大的關(guān)系。刺參體壁膠原蛋白最高溶解度出現(xiàn)在pH2～3。當(dāng)NaCl濃度大于8％以后，溶解度則隨鹽

4、濃度的增大而劇烈下降。與甘油相比，刺參體壁膠原蛋白顯示出更好的保水性。 (3)研究了對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的抑制效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了，刺參體壁膠原蛋白具有較高的抑制活性，IC<,so>值為1.34mg／mL。 (4)研究了刺參體壁膠原蛋白在鄰苯三酚自氧化體系中對(duì)超氧陰離子的清除作用和在Fenton體系中對(duì)羥基自由基的清除作用。膠原蛋白對(duì)超氧陰離子的清除作用隨著濃度的增加而增大，當(dāng)濃度為3mg／mL時(shí)，對(duì)超氧陰離子的