人工養(yǎng)殖大鯢營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)評(píng)價(jià)和鯢皮中膠原蛋白的提取及理化性質(zhì)研究.pdf

1、本研究首先通過對(duì)人工養(yǎng)殖大鯢(Andrias davidianus Blanchard)肌肉和鯢皮的一般營(yíng)養(yǎng)成分、氨基酸組成和礦物質(zhì)元素含量進(jìn)行分析及評(píng)價(jià),同時(shí)采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化人工養(yǎng)殖大鯢皮中膠原蛋白的提取工藝參數(shù),并對(duì)經(jīng)純化的酸溶性膠原蛋白(Acid-soluble collagen, ASC)和酶促溶性膠原蛋白(Pepsin-soluble collagen, PSC)進(jìn)行理化性質(zhì)的研究,旨在為人工養(yǎng)殖大鯢資源的綜合開發(fā)利用提供

2、科學(xué)的理論指導(dǎo)。研究結(jié)果表明:
　　人工養(yǎng)殖大鯢肌肉和鯢皮中蛋白質(zhì)含量分別高達(dá)(92.60±4.24)g/100 g、(96.46±5.32)g/100 g(占干重);脂肪含量低,分別為(6.24±1.78)g/100 g、(4.02±0.62) g/100 g(干重)。鯢肉蛋白質(zhì)中共含18種氨基酸,其中6種呈味氨基酸占到氨基酸總量的42.77％,8種人體必需氨基酸占到氨基酸總量的40.72%,必需氨基酸與非必需氨基酸的比值為68

3、.68%,均符合FAO/W HO的理想模式,無限制性氨基酸;鯢皮蛋白質(zhì)中富含含硫氨基酸,第一、第二限制性氨基酸分別為色氨酸、亮氨酸。此外大鯢肌肉和鯢皮中富含礦物質(zhì)元素,其中鉀含量最高,分別為(1184.96±73.84)mg/100g、(391.24±87.69)mg/100g(占干重);微量元素中,含量較高的是鋅和鐵。
　　人工養(yǎng)殖大鯢皮中富含膠原蛋白,其含量為(19.00±2.66)g/100 g(占濕重),干重為60.66%

4、,約占鯢皮中蛋白質(zhì)總量的62.89%。為優(yōu)化人工養(yǎng)殖大鯢皮中膠原蛋白的提取工藝,本研究選用胃蛋白酶作為提取用酶,以0.5 mo l/L乙酸作為提取溶液,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,運(yùn)用響應(yīng)面分析法對(duì)酶法提取鯢皮中膠原蛋白的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,建立了膠原蛋白提取率的二次多項(xiàng)式回歸模型,并確定了實(shí)際最優(yōu)提取工藝為:加酶量16.50%。液料比15 mL/g,酶解時(shí)間29h,此時(shí)膠原蛋白提取率為66.99%,與理論提取率67.83%的相對(duì)誤差僅為1.24

5、%,且與空白試驗(yàn)相比,添加胃蛋白酶進(jìn)行酶解之后,膠原蛋白提取率有了顯著提高(提取率從28.88%增加至66.99%)。同時(shí)試驗(yàn)結(jié)果也表明,3個(gè)因素對(duì)鯢皮中膠原蛋白提取率的影響大小次序?yàn)?液料比>酶解時(shí)間>加酶量;交互項(xiàng)中“液料比-酶解時(shí)間”項(xiàng)對(duì)提取率影響顯著,其他交互項(xiàng)對(duì)提取率影響不顯著。
　　對(duì)經(jīng)純化后的ASC和PSC進(jìn)行理化性質(zhì)的研究,結(jié)果表明:ASC和PSC都包含了2條α鏈及它們的二聚體β鏈,說明膠原蛋白的構(gòu)型為Ⅰ型。氨基酸

6、組成分析表明:ASC和PSC中甘氨酸含量最高,其次是谷氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸,胱氨酸含量最低,符合膠原蛋白的氨基酸組成特點(diǎn);鯢皮ASC中亞氨基酸含量低于PSC,可知PSC的熱穩(wěn)定性要優(yōu)于ASC。紫外圖譜顯示ASC和PSC的最大吸收峰分別位于233.0nm、232.0 nm處,符合膠原蛋白的吸收特征。傅立葉變換紅外光譜圖表明,ASC和PSC的特征吸收頻率相似,且酰胺Ⅲ帶及ASC、PSC分別位于1454.63-1233.02 cm-1、14