?；撬釋Υ笫笠暽窠?jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷修復(fù)的影響.pdf

1、目的:中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)損傷后再生問題一直是近年來研究比較活躍的領(lǐng)域,視神經(jīng)損傷是常見的一類眼外傷,損傷后常嚴(yán)重影響患者的視力,且視神經(jīng)是中樞神經(jīng)的代表,因此視神經(jīng)損傷再生修復(fù)的研究倍受眼科及神經(jīng)科學(xué)者的關(guān)注。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞廣泛存在于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng),作為神經(jīng)細(xì)胞的一種輔助成分,不僅對神經(jīng)元起支持和營養(yǎng)作用,而且對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和損傷修復(fù)起著積極作用。星形膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種,

2、在神經(jīng)系統(tǒng)受到損害時表現(xiàn)出迅速而活躍的反應(yīng),使膠原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidicprotein,GFAP)表達(dá)增加,協(xié)助其它神經(jīng)營養(yǎng)因子發(fā)揮神經(jīng)營養(yǎng)作用。在許多神經(jīng)變性疾病均發(fā)現(xiàn)GFAP免疫反應(yīng)性的改變,它被認(rèn)為是中樞神經(jīng)損傷的靈敏指標(biāo)?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)參與了多種細(xì)胞外基質(zhì)重塑的生理和病理過程,MMP-2和MMP-9均能同巨噬細(xì)胞一起清除損傷的殘

3、余組織,有助于促進(jìn)軸突生長。牛磺酸(2一氨基乙磺酸,俗名牛膽堿、牛膽素,英文名Taurine)有抗氧化、保護(hù)心肌、降血壓、抗心衰、抗心律失常、降血脂、降血糖等作用,在神經(jīng)系統(tǒng)可以促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的樹突分化及細(xì)胞增殖。本實驗及相關(guān)實驗通過制備視神經(jīng)不完全損傷動物模型,從形態(tài)學(xué)及凋亡、再生方面觀察?；撬崛響?yīng)用對不完全損傷后視神經(jīng)的影響,并探討其作用機(jī)制,以求在促進(jìn)視神經(jīng)損傷后再生方面尋找新的治療藥物并拓寬?；撬嵩谂R床的應(yīng)用。
　　 方

4、法:健康清潔級飼養(yǎng)雌性SD大鼠84只,體重250g±10g。常規(guī)眼部檢查無眼疾。隨機(jī)分為正常組12只(24眼)用于實驗研究,對照組、預(yù)處理組與治療組各24只,致傷右眼用于實驗研究。按傷后3天、7天、14天、28天分四個時間點,各時間點各組分別取6眼進(jìn)行實驗研究。對照組、預(yù)處理組與治療組各24只右眼制備視神經(jīng)不完全損傷模型。對照組于造模成功后1小時開始給予250mg/kg蒸餾水腹腔注射,每日一次,至實驗結(jié)束;治療組于造模成功后1小時開始給

5、予5％?；撬?蒸餾水配制)腹腔注射,每日一次,至實驗結(jié)束;預(yù)處理組于造模前3天開始腹腔注射5％?；撬?每日一次,至實驗結(jié)束;正常組不予處理。各組分別于傷后四個時間點取6眼視神經(jīng)用免疫組織化學(xué)法檢測GFAP及MMP-9平均光密度值,用RT-PCR檢測MMP-2mRNA。實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,結(jié)果采用方差分析和兩樣本t檢驗,SPSS14.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1視神經(jīng)組織中GFAP的表達(dá)在正常組

6、視神經(jīng)組織中GFAP呈弱陽性表達(dá),在實驗的3天、7天、14天、28天時無明顯變化。對照組與正常組相比,在損傷后3天、7天、14天時GFAP的表達(dá)均明顯增強(qiáng)(p＜0.05),在損傷后28天時差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。治療組與對照組相比,在損傷后3天、7天、14天、28天時表達(dá)明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。預(yù)處理組與對照組相比,在損傷后各時間點的表達(dá)均顯著增高,(3天、7天、14天時p＜0.01,28天時p＜0.05)

7、。預(yù)處理組與治療組相比,損傷后3天時表達(dá)增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05),之后與治療組表達(dá)趨于一致,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 2視神經(jīng)組織中MMP-9的表達(dá)在正常組視神經(jīng)組織中無MMP-9的表達(dá),對照組于視神經(jīng)損傷后3天時MMP-9表達(dá)最高,7天時下降,28天時仍有表達(dá)。治療組與對照組相比,各時間點MMP-9的陽性表達(dá)均明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p均＜0.05)。預(yù)處理組與對照組相比各時間點MMP-9的陽

8、性表達(dá)均明顯增高(3天、28天時p＜0.01,7天、14天時p＜0.05)。預(yù)處理組與治療組相比,在視神經(jīng)損傷后3天時MMP-9的陽性表達(dá)明顯增高(p＜0.05),其后與治療組相近(p＞0.05)。
　　 3視神經(jīng)組織中MMP-2mRNA的表達(dá)各組視神經(jīng)組織中均有MMP-2mRNA表達(dá),正常組各時間點無明顯變化。對照組與正常組相比,在損傷后3天、7天、14天時MMP-2mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05),在損

9、傷后28天時與正常組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。治療組與對照組相比,視神經(jīng)損傷后各時間點均有明顯上調(diào)(p＜0.05)。預(yù)處理組在損傷后各時間點的表達(dá)與對照組相比均顯著增高(3天、14天、28天時p＜0.05,7天時p＜0.01)。預(yù)處理組與治療組相比,在損傷后3天時表達(dá)增強(qiáng),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05),之后與治療組表達(dá)趨于一致(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.大鼠視神經(jīng)不完全損傷后視神經(jīng)組織中