輸血對早產(chǎn)兒紅細(xì)胞NO生物活性及血流動力學(xué)的關(guān)系研究.pdf

1、本研究以貧血且接受輸血的早產(chǎn)兒為研究對象，探討輸血前后早產(chǎn)兒外周血RSNO變化，同時觀察環(huán)鳥甘單磷酸及ROS變化，以及對臨床預(yù)后轉(zhuǎn)歸的影響，對輸血的有效性及安全性進(jìn)行探討，為制定可以的輸血策略，改良紅細(xì)胞保存方式提供依據(jù)。
　　 第一部分：輸血對早產(chǎn)兒紅細(xì)胞NO生物活性的影響
　　 目的：
　　 1.觀察輸血前后，早產(chǎn)兒動脈血亞硝基硫醇濃度的變化與NO代謝產(chǎn)物硝酸鹽及亞硝酸鹽的改變，了解輸血前后體內(nèi)NO儲存的變化

2、。
　　 2.觀察輸血對NO/cGMP通路的影響。
　　 3.通過檢測丙二醛及超氧化物歧化酶的變化來觀察探討輸血前后ROS的變化。
　　 方法：
　　 1.研究對象的選擇
　　 以首次入住我院NICU，胎齡<35周，住院期間接受輸血的早產(chǎn)兒30例為研究對象。患兒有免疫性溶血性疾病、先天性心臟病、其他重大出生缺陷導(dǎo)致需外科手術(shù)、染色體異常、有急性失血病史、因經(jīng)濟或其他原因中途放棄治療、轉(zhuǎn)入我院前在外

3、院治療有輸血病史及參加其他臨床研究可能對本研究結(jié)果有影響的早產(chǎn)兒不列入研究范圍。輸血量以15-20ml/kg于4-5小時內(nèi)輸入。
　　 2.血標(biāo)本的采集
　　 對滿足入選標(biāo)準(zhǔn)的貧血早產(chǎn)兒，在輸血前4小時內(nèi)，輸血完成后2小時內(nèi)，輸血后24小時時收集動脈血標(biāo)本，分別用肝素及乙二胺四乙酸抗凝，血標(biāo)本采集30min內(nèi)離心，紅細(xì)胞內(nèi)加入紅細(xì)胞穩(wěn)定液，將血漿和紅細(xì)胞分別避光液氮保存。
　　 3.用納米金電化學(xué)法檢測貧血早產(chǎn)兒

4、輸血前4小時內(nèi)，輸血后2小時內(nèi)，輸血后24小時時動脈血血漿及紅細(xì)胞中RSNO的變化。用硝酸鹽還原酶法檢測輸血前4小時內(nèi)、輸血后2小時內(nèi)、24小時，貧血早產(chǎn)兒動脈血血漿NO3?與NO2?濃度的變化。硫代巴比妥法法檢測MDA，黃嘌呤氧化酶發(fā)檢測SOD活性，用酶聯(lián)免疫吸附反競爭法檢測cGMP，觀察輸血前4小時內(nèi)、輸血后2小時內(nèi)及輸血后24小時血漿內(nèi)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.輸血后2小時內(nèi)血漿及紅細(xì)胞RSNO比輸血前顯著

5、下降（血漿：850.55±334.14pA vs1220.0±323.2pA,P<0.05；紅細(xì)胞：14.35±4.72 nA/mmo vs21.4±6.35nA/mmol，P<0.05）。輸血后2小時內(nèi)、24小時血漿內(nèi)NO3?與NO2?之和與輸血前4小時相比均有顯著下降（P<0.01）。
　　 輸血后24小時紅細(xì)胞內(nèi)RSNO為(19.34±5.77)nA/mmol，與輸血后2小時內(nèi)相比，有上升趨勢，但兩者無顯著性差異。與輸血前

6、水平略低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 輸血后24小時RSNO水平在(918.73±321.58)pA，明顯低于輸血前水平，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與輸血后2小時內(nèi)相比有上升趨勢，但兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.cGMP變化：輸血前4小時內(nèi)血漿內(nèi)cGMP水平在(150.85±26.09)pmol/ml，輸血后2小時內(nèi)和24小時分別為(146.83±23.06)pmol/ml和(150.43±23.12)p

7、mol/ml，輸血前與輸血后相比無顯著性差異。
　　 3.MDA和SOD變化：
　　 輸血前血漿內(nèi)MDA水平在(5.66±2.87)nmol/ml，輸血后2小時內(nèi)升至(6.73±3.32)nmol/ml，與前者相比兩者有顯著性差異（P<0.05）。
　　 輸血后24小時血漿MDA水平在(6.50±3.83)nmol/ml，與輸血前相比平均水平雖有增加，但兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與輸血2小時相比兩者無顯著性差異

8、>　　 輸血前血漿內(nèi)SOD水平在(100.00±10.44)U/ml，輸血后2小時內(nèi)SOD下降至(92.81±10.11)U/ml，與前者相比，兩者有顯著性差異（P<0.05）。
　　 輸血后24小時血漿內(nèi)SOD水平逐漸上升至(99.42±12.87)U/ml，與輸血后2小時內(nèi)相比有顯著性差異（P<0.05)；與輸血前水平相當(dāng)，無顯著性差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.輸血后會引起血漿及紅細(xì)胞NO儲存迅速下降，但

9、可以隨著時間延長逐漸恢復(fù)到原來水平。
　　 2.輸血后NO/cGMP通路未明顯變化。提示NO儲備雖有減少，但NO/cGMP通路可能不受輸血影響。
　　 3.輸血會造成暫時性氧化應(yīng)激損傷，輸血后2小時，血漿內(nèi)MDA升高，血漿總SOD活力下降，輸血后24小時均有不同程度的改善。
　　 第二部分：輸血對貧血早產(chǎn)兒臨床血流動力學(xué)變化
　　 目的：
　　 1.觀察輸血前后血壓、心率、脈搏等生命體征的變化

10、r>　　 2.觀察輸血前后氧合、呼吸機參數(shù)以及血乳酸的變化
　　 3.觀察輸血前后心輸出量的變化
　　 方法：
　　 1.研究對象的選擇
　　 以首次入住我院NICU，胎齡<35周，住院期間接受輸血的早產(chǎn)兒30例為研究對象。
　　 2.排除標(biāo)準(zhǔn)
　　 1)有明顯的感染癥象；
　　 2)病情嚴(yán)重，隨時有生命危險；
　　 3)有免疫性溶血性疾?。?br>　　 4)先天性心臟

11、病，包括動脈導(dǎo)管未閉者；
　　 5)其他重大出生缺陷導(dǎo)致需外科手術(shù)；
　　 6)染色體異常者或其他畸形；
　　 7)有急性失血；
　　 8)因經(jīng)濟或其他原因中途放棄治療者；
　　 9)患兒參加其他臨床研究可能對本研究結(jié)果有影響者。
　　 3.觀察指標(biāo)
　　 輸血前及輸血后24小時內(nèi)血壓、呼吸、脈搏、體溫等生命體征的變化；觀察輸血前及輸血后24小時內(nèi)氧合、呼吸機參數(shù)以及乳酸變化等；觀

12、察10例輸血前及輸血后24小時心輸血量的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.觀察30例早產(chǎn)兒中，需機械輔助通氣10例，CPAP依賴3例，面罩或鼻導(dǎo)管吸氧10例，可自主呼吸不依賴氧氣7例。對其中10例早產(chǎn)兒觀察其輸血前后心輸血量的變化。
　　 2.輸血后24小時心率明顯下降，從原來的(150.63±10.87)次/分，下降至146.75±13.0次/分（P　　

13、3.輸血后24小時內(nèi)患兒氧合情況改善不明顯，呼吸機使用參數(shù)，乳酸均無顯著性變化。
　　 4.輸血前及輸血后24小時，心輸血量雖有下降趨勢，從輸血前的250.4±71.3ml/kg/min下降為輸血后的239.1±64.4ml/kg/min，但兩者相比無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.輸血后心率明顯下降，但對其他血液動力學(xué)指標(biāo)無明顯影響。
　　 2.輸血對早產(chǎn)兒氧合情況改善不明顯。
　　 第三

14、部分：不同輸血策略對貧血早產(chǎn)兒臨床預(yù)后的影響
　　 目的：
　　 1.通過回顧性研究比較限制性輸血組與非限制性輸血組的患兒院內(nèi)感染、住院天數(shù)、死亡率等一些臨床預(yù)后情況。
　　 方法：
　　 1.研究對象的選擇
　　 對2004年至2008年首次入住我院NICU，體重<1500g，住院時間超過2周且住院期間接受輸血的早產(chǎn)兒為研究對象。排除標(biāo)準(zhǔn)同實驗第一部分。最后入選130名例，其中限制性輸血組57例

15、，非限制性輸血組73例。
　　 2.分組標(biāo)準(zhǔn)
　　 限制性輸血組的各輸血閾值根據(jù)美國2008年早產(chǎn)兒輸血指南，非限制性輸血組則在限制性輸血閾值基礎(chǔ)上結(jié)合患兒的實際情況及目前國內(nèi)輸血策略適當(dāng)提高Hct閾值。對于一般病情穩(wěn)定，不需要輔助通氣，限制性非限制性分別為Hct<21％和<30％；對于需要吸氧，頻發(fā)呼吸暫停需要氣囊復(fù)蘇，或心率>180次/min或呼吸>80次/min持續(xù)24h以上，或體重增加不理想(<10g/d)的患兒

16、，限制性輸血組要確保Hct>31％，非限制性組>38％；對于需要CPAP或機械輔助通氣的患兒，限制性輸血組和非限制性輸血組的輸血閾值Hct分別為36％和46％。
　　 3.觀察指標(biāo)
　　 ①患兒的基本情況：包括患兒的胎齡，性別，出生體重，apgar評分，入院Hct，是否輔助通氣、多胎等。
　　 ②患兒的輸血情況：入院基礎(chǔ)Hct，輸血前Hct，輸血量，輸血次數(shù)，首次輸血時日齡。
　　 ③觀察指標(biāo)：輸血前后血

17、壓、呼吸、脈搏、體溫等生命體征以及呼吸機的使用參數(shù)的變化等；住院天數(shù)，死亡率，院內(nèi)感染率，呼吸暫停次數(shù)及程度的變化，氨茶堿的使用，體重恢復(fù)，PDA是否重新開放，輸血反應(yīng)等。
　　 結(jié)果：
　　 1.兩組患兒的基本情況相似，出生體重、孕周、Apgar評分，入院Hct均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2.限制性輸血組患兒接受輸血前的Hct為(29.7±5.56)％，要明顯低于非限制性輸血組患兒(36.5±6

18、.43)％（P<0.01）；限制性輸血患兒和非限制性輸血患兒每次接受輸血量相當(dāng)(23.7±6.1 vs23.3±7.7，P>0.05)，接受輸血總量雖有增加（0.63±0.41 VS0.56±0.54)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 3.非限制性輸血患者機械輔助通氣天數(shù)比限制性輸血組明顯減少(5.9±4.7 vs7.5±6.7，P<0.05)。在院內(nèi)感染、住院天數(shù)、死亡率、體重恢復(fù)、呼吸暫停次數(shù)及程度等方面兩種輸血