慢性顳葉癲癇模型鼠海馬結(jié)構(gòu)形態(tài)學和電生理的變化.pdf

1、目的：在建立紅藻氨酸慢性顳葉癲癇動物模型的基礎(chǔ)上，觀察其發(fā)展過程中海馬結(jié)構(gòu)形態(tài)學和電生理方面的變化，探討該模型的病理機制和致癇機理。 方法：應(yīng)用立體定向技術(shù)，微量注射紅藻氨酸(kainicacid，KA)于Sprague-Dawkey(SD)大鼠側(cè)腦室內(nèi)制作慢性顳葉癲癇動物模型，通過行為學觀察、腦電圖檢測、病理學切片和死亡率的統(tǒng)計證實該方法制作慢性顳葉癲癇動物模型的可靠性和可行性；然后根據(jù)行為學分期對不同時期的實驗?zāi)Ｐ褪笕『ｑR結(jié)

2、構(gòu)的標本，行神經(jīng)元特異性烯醇酶(Neuron-specificenolase，NSE)和5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine，BrdU)標記并計數(shù)、Timm's染色、TUNEL及Nestin檢測，并記錄慢性期海馬結(jié)構(gòu)齒狀回顆粒細胞的單細胞放電情況，觀察模型發(fā)展各階段海馬結(jié)構(gòu)形態(tài)學和電生理方面的改變。 結(jié)果：該模型鼠在行為學上出現(xiàn)Ⅳ級以上的癥狀，并且可以分為三期：急性期，靜止期，慢性期；腦電圖于急性期和慢性

3、期出現(xiàn)典型的癲癇發(fā)作及發(fā)作間期表現(xiàn)；病理檢查發(fā)現(xiàn)海馬的硬化；NSE標記神經(jīng)元計數(shù)發(fā)現(xiàn)CA3、CA4區(qū)神經(jīng)元從急性期開始逐漸減少，慢性期細胞數(shù)量最少，齒狀回神經(jīng)細胞數(shù)量無明顯變化；BrdU標記神經(jīng)元計數(shù)發(fā)現(xiàn)第8天新生細胞數(shù)量明顯增多；Timm's染色顯示從靜止期開始出現(xiàn)苔蘚纖維(Mossyfiber,MF)發(fā)芽并進行性增加；TUNEL染色顯示海馬結(jié)構(gòu)的細胞死亡存在凋亡機制；Nestin標記發(fā)現(xiàn)海馬顆粒細胞下層三期內(nèi)一直存在陽性細胞，靜止期

4、陽性細胞數(shù)最多并分布于整個海馬結(jié)構(gòu)，慢性期陽性細胞仍然分布于整個海馬結(jié)構(gòu)，但是數(shù)量較靜止期少；慢性期齒狀回顆粒細胞單位放電的頻率增加。 結(jié)論：1.側(cè)腦室微量注射KA能穩(wěn)定的復制出慢性顳葉癲癇動物模型；2.該動物模型存在CA3、CA4區(qū)神經(jīng)元減少、苔蘚纖維發(fā)芽和細胞凋亡增加現(xiàn)象；3.慢性顳葉癲癇動物模型齒狀回出現(xiàn)較多新生神經(jīng)元，且存在分布和形態(tài)異常；4.該動物模型齒狀回顆粒細胞存在單位放電的異常，可能是導致其慢性期癇樣發(fā)作的重要原