內(nèi)側(cè)顳葉癲癇海馬蛋白質(zhì)組學(xué)的改變.pdf

1、目的：建立內(nèi)側(cè)顳葉癲癇患者海馬組織蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳圖譜，初步分析海馬蛋白質(zhì)的表達(dá)，以了解MTLE的發(fā)病機(jī)制，尋找新的治療靶點(diǎn)。 方法：研究對(duì)象分為兩組，其中癲癇組為2007年07月至2008年04月期間中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科收治的5例MTLE患者，收集其手術(shù)切除的病變海馬組織。對(duì)照組為3例湘雅醫(yī)院病理科尸解獲得的海馬組織。提取兩組標(biāo)本蛋白后，通過固相pH梯度（IPG）二維聚丙烯酰胺凝膠電泳（2D-PAGE）技術(shù)分離蛋白質(zhì)，考

2、馬斯亮藍(lán)染色，Imagescanner掃描儀以及LabScan掃描軟件對(duì)凝膠進(jìn)行掃描獲取圖像。利用圖像分析軟件PDQuest，以對(duì)照組的2-DE凝膠為參考膠，將癲癇組的2-DE凝膠與之進(jìn)行比較分析，尋找兩組海馬組織蛋白質(zhì)譜的異常變化斑點(diǎn)。然后篩選出差異明顯的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)，切取后進(jìn)行基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）分析，獲得肽質(zhì)量指紋圖譜（PMF），運(yùn)用生物信息學(xué)技術(shù)獲取蛋白的基本信息，確定差異蛋白質(zhì)，并對(duì)所鑒

3、定的差異蛋白質(zhì)進(jìn)行功能歸類分析。 結(jié)果：對(duì)照組海馬組織分離獲得蛋白質(zhì)斑點(diǎn)834±56個(gè)，癲癇組海馬組織分離獲得蛋白質(zhì)斑點(diǎn)856±40個(gè)。比較發(fā)現(xiàn)，有54個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)存在著量或質(zhì)的差別。其中，有11個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)僅在對(duì)照組表達(dá)，有3個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)僅在癲癇組表達(dá)；與對(duì)照組海馬蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)量相比，癲癇組海馬有30個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)量有2倍以上的上調(diào)，有10個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)表達(dá)量有2倍以上的下調(diào)。對(duì)差異明顯的41個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF-MS分析，