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文檔簡介
1、目的:建立內側顳葉癲癇患者海馬組織蛋白質雙向凝膠電泳圖譜,初步分析海馬蛋白質的表達,以了解MTLE的發(fā)病機制,尋找新的治療靶點。 方法:研究對象分為兩組,其中癲癇組為2007年07月至2008年04月期間中南大學湘雅醫(yī)院神經外科收治的5例MTLE患者,收集其手術切除的病變海馬組織。對照組為3例湘雅醫(yī)院病理科尸解獲得的海馬組織。提取兩組標本蛋白后,通過固相pH梯度(IPG)二維聚丙烯酰胺凝膠電泳(2D-PAGE)技術分離蛋白質,考
2、馬斯亮藍染色,Imagescanner掃描儀以及LabScan掃描軟件對凝膠進行掃描獲取圖像。利用圖像分析軟件PDQuest,以對照組的2-DE凝膠為參考膠,將癲癇組的2-DE凝膠與之進行比較分析,尋找兩組海馬組織蛋白質譜的異常變化斑點。然后篩選出差異明顯的蛋白質斑點,切取后進行基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)分析,獲得肽質量指紋圖譜(PMF),運用生物信息學技術獲取蛋白的基本信息,確定差異蛋白質,并對所鑒
3、定的差異蛋白質進行功能歸類分析。 結果:對照組海馬組織分離獲得蛋白質斑點834±56個,癲癇組海馬組織分離獲得蛋白質斑點856±40個。比較發(fā)現,有54個蛋白質點存在著量或質的差別。其中,有11個蛋白質點僅在對照組表達,有3個蛋白質點僅在癲癇組表達;與對照組海馬蛋白質點表達量相比,癲癇組海馬有30個蛋白質點表達量有2倍以上的上調,有10個蛋白質點表達量有2倍以上的下調。對差異明顯的41個蛋白質點進行MALDI-TOF-MS分析,
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