內側顳葉癲癇海馬蛋白質組學的改變.pdf

1、目的：建立內側顳葉癲癇患者海馬組織蛋白質雙向凝膠電泳圖譜，初步分析海馬蛋白質的表達，以了解MTLE的發(fā)病機制，尋找新的治療靶點。 方法：研究對象分為兩組，其中癲癇組為2007年07月至2008年04月期間中南大學湘雅醫(yī)院神經外科收治的5例MTLE患者，收集其手術切除的病變海馬組織。對照組為3例湘雅醫(yī)院病理科尸解獲得的海馬組織。提取兩組標本蛋白后，通過固相pH梯度（IPG）二維聚丙烯酰胺凝膠電泳（2D-PAGE）技術分離蛋白質，考

2、馬斯亮藍染色，Imagescanner掃描儀以及LabScan掃描軟件對凝膠進行掃描獲取圖像。利用圖像分析軟件PDQuest，以對照組的2-DE凝膠為參考膠，將癲癇組的2-DE凝膠與之進行比較分析，尋找兩組海馬組織蛋白質譜的異常變化斑點。然后篩選出差異明顯的蛋白質斑點，切取后進行基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜（MALDI-TOF-MS）分析，獲得肽質量指紋圖譜（PMF），運用生物信息學技術獲取蛋白的基本信息，確定差異蛋白質，并對所鑒

3、定的差異蛋白質進行功能歸類分析。 結果：對照組海馬組織分離獲得蛋白質斑點834±56個，癲癇組海馬組織分離獲得蛋白質斑點856±40個。比較發(fā)現，有54個蛋白質點存在著量或質的差別。其中，有11個蛋白質點僅在對照組表達，有3個蛋白質點僅在癲癇組表達；與對照組海馬蛋白質點表達量相比，癲癇組海馬有30個蛋白質點表達量有2倍以上的上調，有10個蛋白質點表達量有2倍以上的下調。對差異明顯的41個蛋白質點進行MALDI-TOF-MS分析，