雙酶體系的共固定化及其動力學研究.pdf

1、本文選取工業(yè)上較為常用、價格低廉的硅藻土和海藻酸鈣為載體分別用吸附法和包埋法共固定化α-淀粉酶和糖化酶雙酶體系。其方法簡單，操作簡便，成本低廉，更適合工業(yè)化大生產。 本文研究了雙酶比例和固定化條件對兩種共固定化酶反應速率的影響。得到硅藻土共固定化雙酶體系的最佳共固定化條件為：載體(g)∶糖化酶(U)∶α-淀粉酶(U)=1∶100∶160；溫度為5℃-15℃；pH為4.5-5.5。海藻酸鈣共固定化雙酶體系的最佳共固定化條件為：海藻

2、酸鈉濃度為3％-4％，CaCl2濃度為2％；酶濃度為糖化酶20U/ml，α-淀粉酶24U/ml；糖化酶(U)∶α-淀粉酶(U)=1∶1.2；溫度為50℃-70℃；pH為4.0-5.5。并比較了兩種共固定化酶的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性、儲藏穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性，得出兩種共固定化酶的最適反應溫度分別為50℃-60℃(硅藻土)和55℃-65℃(海藻酸鈣)；最適反應pH均為5.0；其米氏常數Km為16.830mg/ml(硅藻土)和10.467mg/m

3、l(海藻酸鈣)。 而共固定化酶的動力學研究以硅藻土共固定化酶為研究對象，是建立在游離雙酶協(xié)同水解淀粉動力學和固定化酶在受產物抑制時的動力學基礎上，并提出了共固定化酶的動力學模型：協(xié)同作用階段α-淀粉酶的水解作用存在外擴散阻力和內擴散阻力，而糖化酶僅受到內擴散阻力；協(xié)同作用結束后糖化酶的水解反應同時受到外擴散阻力和內擴散阻力的影響，并推導出其動力學方程，通過實驗結果和模擬計算結果的比較，兩者吻合的較好。該動力學模型在一定范圍內能較