BMP-4-ALK-3在小鼠脛骨牽引成骨過程中的表達(dá).pdf

1、目的:建立小鼠脛骨牽引成骨模型,分析骨形態(tài)形成蛋白4(BoneMorphogenetic Protein4,BMP-4)及其受體(activin-like kinase3,AIK-3)在牽引成骨過程中的表達(dá),探討機(jī)械牽張力轉(zhuǎn)化為生物信號(hào)從而調(diào)節(jié)骨再生過程的機(jī)制。
　　 方法:選取36只健康雄性8周齡CD-1小鼠,腹腔內(nèi)注射苯巴比妥鈉(30mg/kg)麻醉下,所有小鼠均接受左脛骨中上段骨干橫行截骨,安置特制延長外固定架。方法為常規(guī)

2、消毒皮膚后,于左脛骨中上段截骨處,用27號(hào)注射針頭鉆孔數(shù)個(gè)后,無菌剪刀剪斷脛骨干。然后于截骨處遠(yuǎn)近端分別經(jīng)皮穿交叉27號(hào)注射針頭,并安置延長外固定架。脛骨牽引過程中包括5天靜止期,12天牽引期和14天固塑期。牽引速率為0.1mm/次,2次/天,共0.2mm/天,術(shù)后于第5,9,13,17,24,31天分組殺取動(dòng)物,采集左脛骨標(biāo)本,分別作組織學(xué)檢查、RT-PCR和原位雜交試驗(yàn)分析,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只小鼠。
　　 結(jié)果:組織學(xué)檢查顯示靜

3、止期其修復(fù)過程基本與骨折愈合過程相似。牽引期,被牽引骨痂顯示出三個(gè)典型的生物學(xué)功能區(qū):纖維間區(qū),初始骨基質(zhì)前沿和微骨柱形成區(qū)。在固塑期早期,牽引骨痂骨性愈合。RT-PCR和原位雜交分析顯示機(jī)械牽張力能提高BMP-4、ALK-3的表達(dá)。
　　 結(jié)論:1、牽引成骨是一種持續(xù)的骨再生過程,機(jī)械張力通過刺激局部生長因子及其受體(如BMP-4和ALK-3)以及細(xì)胞外基質(zhì)(如骨鈣素)的持續(xù)表達(dá),維持骨痂的不斷形成和再塑,從而填充被逐漸延長的