人類肝門部膽管癌裸鼠瘤株的建立及其生物學特性研究.pdf

1、山東大學碩士學位論文人類肝門部膽管癌裸鼠瘤株的建立及其生物學特性研究姓名：叢超申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學（普外）指導教師：吳小鵬20030330山東大學碩士學位論文人類rFl：f7部膽管癌裸鼠瘤株的建立及其生物學特性研究研究生叢超導師吳小鵬副教授專業(yè)外科學(普外)摘要目的：建立人肝門部膽管癌裸鼠瘤株模型，探討其生物學特性。方法：將手術切除的人肝fj@膽管癌標本進行細胞培養(yǎng)，傳代。收集第40代、50代瘤細胞接種于4只Balb／c裸小鼠

2、后肢背側皮下。50天后，1只Balb／c裸小鼠后肢背側皮下移植瘤長至14x10mm，切取瘤組織移植于同系同品種Balb／c裸小鼠后肢背側皮下。記錄每代腫瘤生長的潛伏期，每5天測量腫瘤體積，記錄腫瘤外觀，裸鼠生活情況。處死荷瘤鼠時觀察有無肝、肺轉移并行病理檢查。各代瘤株行系列檢查并與人肝門部膽管癌標本進行比較并觀察腫瘤病理結構；采用實體腫瘤體外直接分散法制備染色體，確定該瘤株核型及其眾數(shù)；透射電子顯微鏡觀察癌細胞超微結構特點；酶聯(lián)免疫定量

3、檢測法檢測：糖鏈抗原199(CAl99)、糖鏈抗原125(CAl25)、癌胚抗原(CEA)及甲胎蛋白(AFP)；免疫組織化學(SABC)法測定血管內皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、增殖細胞核抗原(PCNA)、bcl2及P53蛋白，確定膽管癌瘸株表達上述腫瘤標記物強度。繪制第1代至第5代肝門部膽管癌裸鼠瘤株生長曲線。結果：原代移植成功率為25％(1／4)，皮下移植腫瘤后，移植瘤體積縮小，經28天潛伏期后，瘤株迅