高脂飼料及藥物干預(yù)對大鼠腸道微生物的影響.pdf

1、肥胖高血脂是一種代謝性疾病,會引發(fā)糖尿病、心腦血管、高血壓等其他嚴重疾病,威脅人類的健康。過去人們普遍認為,肥胖高血脂是由于營養(yǎng)過剩和運動缺乏等原因造成的。但是,近年來的研究發(fā)現(xiàn),人體腸道微生物,作為人體的“第二基因組”,可能在人體的代謝性疾病和健康調(diào)控中起著更大的作用。腸道微生物參與人體食物的消化,在腸道中產(chǎn)生益生元或毒素,保護或損壞腸粘膜。所以,腸道菌群對益生元的補充、粘膜的保護、消化和免疫等方面具有重要的影響。本論文通過研究高脂飼

2、料造模處理前后、藥物治療前后大鼠腸道微生物群落結(jié)構(gòu)的差異和變化,旨在了解高脂飲食和受試藥物與腸道微生物之間的關(guān)系,以期從節(jié)食以外的其他方面,如人工干預(yù)腸道微生物的組成,來調(diào)節(jié)人體體重和生理生化指標,維持人類健康。
　　本研究將同一批大鼠隨機分為兩組,第一組(11只)飼喂普通飼料,第二組(55只)飼喂高脂飼料,四周后,測定大鼠血脂兩項水平(血清總膽固醇和甘油三酯),判定是否造模成功。若成功,則將高血脂大鼠隨機分為五組(模型組、陽性藥

3、物組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組)繼續(xù)給予高脂飼料,藥物組開始飼喂藥物(受試中藥:降濁通絡(luò)顆粒,主要成分為紅參、丹參、山楂、澤瀉、玄參、決明子等;陽性藥物:辛伐他汀膠囊)。分別在給藥0、4、7周收集各組大鼠的糞便樣品用于分析腸道微生物的動態(tài)變化;在實驗結(jié)束后解剖大鼠,檢測生理生化指標;收集盲腸和大腸內(nèi)容物,用于腸道微生物的研究。
　　本實驗首先研究了高脂飲食和藥物對Wista大鼠高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(

4、LDL)、血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、丙二醛(MDA)、血漿粘度、血沉(ESR)、肝重共9項生理生化指標的影響。結(jié)果表明:高脂飲食組9項生理指標與正常組均有顯著或極顯著差別,說明高脂飼料引起受試大鼠脂代謝異常,患有高血脂癥。但由于其進食量少于正常對照組,沒有表現(xiàn)出肥胖;藥物治療后,除中藥低劑量組以外,其它藥物治療組與模型組均有顯著或極顯著差異,且接近正常組;中藥低劑量組的HDL、LDL、TC、TG與模型

5、組有顯著差異,但其余5項指標均無顯著差異。其次采用PCR、變性梯度凝膠電泳(DGGE)研究了高脂飲食和藥物對大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果表明:高脂飼喂明顯改變了大鼠腸道微生物的群落結(jié)構(gòu),中藥高、中劑量對腸道微生物結(jié)構(gòu)有明顯的調(diào)節(jié)作用,且有接近陽性藥物的療效;中藥低劑量組沒有明顯調(diào)節(jié)作用。最后采用實時熒
　　光定量PCR對高脂飲食和藥物對大鼠腸道中優(yōu)勢菌群的影響進行了探討,結(jié)果表明:擬桿菌和柔嫩梭菌在肥胖大鼠腸道中的數(shù)量均少于正常對