親和層析與生物質(zhì)譜聯(lián)用技術在生物體內(nèi)蛋白質(zhì)藥物分析中的應用研究.pdf

1、重組人內(nèi)皮抑制素(recombinanthumanendostatin，rh-ET)具有較強的抑制內(nèi)皮細胞繁殖和抑制腫瘤的形成和轉移的作用，現(xiàn)已作為我國第一個血管抑制劑類基因工程抗腫瘤一類新藥經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局批準，正式進入臨床研究。本文以基因重組N-端含有6×His序列標簽的內(nèi)皮抑制素為模型，建立了固相親和層析與生物質(zhì)譜聯(lián)用技術，對給藥動物血清中的微量蛋白質(zhì)藥物、體內(nèi)代謝物和血清蛋白結合物進行富集提取，并鑒定提取的蛋白質(zhì)藥物的方法。

2、為蛋白質(zhì)藥物代謝產(chǎn)物結構分析與蛋白質(zhì)藥物的體內(nèi)代謝途徑研究奠定了基礎。 通過氨基酸組成分析、N-端序列分析、質(zhì)譜分析以及肽質(zhì)量指紋譜分析等方法對rh-ET的結構進行了確證，并得知其中含有兩種組分，其中一種與設計序列一致，另一種在N-末端缺失Met殘基。 動物試驗表明，rh-ET主要通過小鼠泌尿排泄系統(tǒng)代謝排出，其中尿液總放射性濃度最高，血清低于尿、腎和肺和肝位居第四；尿液中的主要成分是親水性代謝物等，藥物原型含量極低，而