毛細管電泳在藥物分析和食品安全檢測中的應用.pdf

1、毛細管電泳技術作為一種迅猛發(fā)展起來的新分離分析技術，以其高效、快速、低實驗消耗等優(yōu)點，受到了廣泛重視，在藥物分析、食品安全監(jiān)測和生命科學領域發(fā)揮著越來越重要的作用。本論文應用毛細管電泳分離分析技術，研究了抗癌藥物紫杉醇及鹽酸普羅帕酮兩種藥物和血清白蛋白結合作用機制；建立了毛細管電泳激光誘導熒光檢測格列吡嗪及毛細管電泳快速分離檢測食品中蘇丹紅的新方法。 本研究論文內容包括兩章。 第一章毛細管電泳在藥物分析和食品安全檢測中的

2、應用依據近年來所發(fā)表的有關毛細管電泳分離分析方面的文獻，對毛細管電泳在藥物分析方面的應用、毛細管電泳研究藥物與蛋白相互作用進展以及食品安全檢測的應用三個方面進行了較為詳盡的論述。 第二章研究報告 第一節(jié)毛細管區(qū)帶電泳研究抗癌藥物紫杉醇與人血清白蛋白結合作用本文采用毛細管區(qū)帶電泳(CZE)技術，研究了天然抗癌藥物紫杉醇(Paclitaxel)與人血清白蛋白(HSA)的結合作用機制。在以硼砂．碳酸鈉(pH=10，50mmol

3、/L)為運行緩沖溶液，運行電壓21kV，進樣時間5.0S，紫外檢測器(214nm)的條件下檢測，結合常數和結合位點數在298K和3lOK分別為K<,298K>=1.7×10<'4>Lmol<'-1>,n<,298K>=4.1，K<,310K>=3.4×10<'4.Lmol<'-1>，n<,310K>=3.0。實驗表明該方法簡單，可靠。 第二節(jié)毛細管電泳研究鹽酸普羅帕酮與人血清白蛋白結合作用本文采用毛細管區(qū)帶電泳(CZE)技術，研

4、究了鹽酸普羅帕酮(Propafenone)與人血清白蛋白(HSA)的結合作用機制。在以硼砂-碳酸氫鈉(pH=10，50mmol/L)為運行緩沖溶液，運行電壓17kv，進樣時間12s，紫外檢測器(214nm)的條件下檢測，結合常數和結合位點數在298K和3lOK分別為。K<,298K>=1.65×10<'6>Lmol<'-1>，n=1.15及K<,310K>=1.92×10<'4>Lmol<'-1>，n<,310K>=1.23。同時運用熒

5、光光譜、紫外吸收光譜研究了鹽酸普羅帕酮與人血清白蛋白的結合作用機制；并從熱力學參數推得了藥物分子與人血清白蛋白分子間作用力類型等分子間相互作用信息。 第三節(jié)高效毛細管電泳—激光誘導熒光檢測格列吡嗪的研究建立了毛細管電泳。激光誘導熒光法測定格列吡嗪的新方法。采用異硫氰酸熒光素(FITC)為衍生劑，考察了衍生緩沖溶液類型、濃度、pH、反應計量比、衍生溫度以及背景緩沖溶液類型、pH值、濃度、進樣時間、電壓等對測定格列吡嗪效果的影響。使

6、用未涂層的毛細管柱(47cm×50μmi.d.,有效柱長40 cm)，10mmol/LNaHCO<,3>-Na<,2>CO<,3>(pH=9.6)為衍生緩沖溶液，在25℃時，異硫氰酸熒光素與格列吡嗪計量比40∶1條件下閉光反應12h后，以40mmol/L Na<,2>B<,4>O<,7>-NaHCO<,3>(pH=9.4)為背景緩沖溶液，在激光波長488 nm、運行電壓14kV條件下，血漿樣品微超濾除蛋白后直接測定。線性范圍為2.24×

7、10<'10>~1.12×10<'-8>mmol/L(r=0.9986)。檢出限為1×10<'-10>mmol/L。結論：在所選擇的條件下，此方法靈敏度高，可以用于血液樣品中含量檢測。第四節(jié)毛細管區(qū)帶電泳法快速檢測食品中蘇丹紅建立了毛細管區(qū)帶電泳快速分離檢測食品中四種蘇丹紅的新方法。考察了背景緩沖溶液類型、pH值、濃度、進樣時間等對分離測定蘇丹紅效果的影響。結果表明，在紫外檢測波長214nm，運行電壓23kV條件下，以50mmol/LN