AS患者B、T細(xì)胞亞群、共刺激分子表達(dá)變化和抗TNF-α治療血清生物標(biāo)記物的初步研究.pdf

1、第一部分強(qiáng)直性脊柱炎B、T細(xì)胞亞群及共刺激分子表達(dá)的變化和意義
　　 背景:強(qiáng)直性脊柱炎(AS)是一種常見全身慢性炎性疾病，主要侵犯脊柱和骶髂關(guān)節(jié)，致殘率高。T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫異常在AS發(fā)病機(jī)制中一直備受關(guān)注，而B淋巴細(xì)胞的作用則很少被提及。最近研究提供的一些證據(jù)顯示B淋巴細(xì)胞在AS的發(fā)病中可能發(fā)揮了作用，但依據(jù)還不充分。其次，B、T細(xì)胞的活化是生理或病理性免疫應(yīng)答的重要組成部分，共刺激分子與B、T細(xì)胞的活化密切相關(guān)，共刺激分

2、子表達(dá)異?？蓪?dǎo)致淋巴細(xì)胞的異常活化，但與AS的炎性損傷過程是否有關(guān)有待進(jìn)一步證實(shí)。臨床實(shí)踐業(yè)已證實(shí)抗TNF-α治療可以非常有效地控制AS的病情活動(dòng)，但其對(duì)免疫系統(tǒng)的影響及治療機(jī)制并不清楚，有待深入研究。
　　 目的:
　　 1.檢測(cè)AS患者外周血B、T淋巴細(xì)胞及亞群、共刺激分子的表達(dá)水平，分析其與臨床指標(biāo)的關(guān)系，探討B(tài)細(xì)胞和共刺激分子在AS發(fā)病機(jī)制中的作用；
　　 2.探討TNF-α拮抗劑對(duì)活動(dòng)性AS患者B、T細(xì)

3、胞及亞群、共刺激分子的影響及其意義。
　　 方法:
　　 1.研究對(duì)象分為:AS組66例，其中病情處于活動(dòng)期39例(定義BASDAI≥4，VAS刻度為0～10cm)，穩(wěn)定期27例(BASDAI<4)；再按其有無外周關(guān)節(jié)受累情況分為外周關(guān)節(jié)和中軸均受累(簡(jiǎn)稱外周型，35例)和單獨(dú)中軸受累(簡(jiǎn)稱中軸型，31例)兩組。
　　 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)組(20例)、健康志愿者對(duì)照組(30例)及依那西普(Enbrel)隨機(jī)雙盲

4、、安慰劑對(duì)照試驗(yàn).AS患者組(39例)。
　　 2.采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)AS、RA及健康志愿者各組受試者外周血CD19+、CD19+CD27-、CD19+CD27dim、CD19+CD27high、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+等B、T細(xì)胞及亞群百分率和CD3+CD28+、CD3+CD154+、CD19+CD80+、CD19+CD86+、CD19+CD40+等共刺激分子的表達(dá)水平，并與ESR、CRP、BASDAI、

5、BASFI、PGA、總體背痛、夜間背痛、晨僵時(shí)間、壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)進(jìn)行相關(guān)分析。
　　 3.Enbrel隨機(jī)雙盲、安慰劑對(duì)照試驗(yàn)活動(dòng)性AS患者(病情處于活動(dòng)期的定義為:1、晨僵持續(xù)時(shí)間和程度的VAS≥30；2、以下中有2項(xiàng)的VAS評(píng)分≥30:①病人總體評(píng)分；②夜間背痛和總體背痛；③BASFI；VAS刻度均為0～100mm)基線、治療第6周外周血B、T細(xì)胞及共刺激分子等相同的指標(biāo)亦采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)，同時(shí)對(duì)ESR、CRP、

6、BASDAI等臨床指標(biāo)進(jìn)行評(píng)估。
　　 結(jié)論:
　　 1.活動(dòng)期或/和外周關(guān)節(jié)受累的AS患者外周血CD19+B細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞比例升高，而CD8+T細(xì)胞比例下降:其中外周關(guān)節(jié)受累AS患者CD19+CD27high B細(xì)胞比例升高顯著；活動(dòng)期和外周關(guān)節(jié)受累AS患者外周血存在B、T細(xì)胞及亞群失衡；
　　 2.活動(dòng)期AS患者外周血B細(xì)胞上CD40共刺激分子和T細(xì)胞上CD154共刺激分子均表達(dá)增加。CD40-CD15

7、4途徑免疫功能紊亂參與了AS免疫致病過程。
　　 3.依那西普治療6周可下調(diào)活動(dòng)性AS患者T細(xì)胞CD154的表達(dá)和同時(shí)上調(diào)B細(xì)胞CD80的表達(dá)。
　　 第二部分依那西普治療對(duì)AS和未分化脊柱關(guān)節(jié)病患者血清MIF、MMP-3、TGF-β1的影響和意義探討
　　 背景:腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在脊柱關(guān)節(jié)病(SpA)兩種常見臨床類型強(qiáng)直性脊柱炎(AS)和未分化脊柱關(guān)節(jié)病(USpA)的炎癥、強(qiáng)直及骨化的發(fā)病過程中發(fā)

8、揮了重要作用。臨床研究顯示大部分SpA患者對(duì)TNF抑制劑具有良好的治療效果，但目前在如何篩選患者作為這類藥物的合適使用者和監(jiān)測(cè)患者治療后的反應(yīng)已經(jīng)成為臨床研究中面臨的難題之一，尋找有關(guān)評(píng)價(jià)疾病活動(dòng)性和治療反應(yīng)的生物學(xué)標(biāo)志物已經(jīng)成為客觀需要?；A(chǔ)和臨床研究表明，巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)參與了炎性關(guān)節(jié)病的發(fā)病過程，因而在SpA病情評(píng)估和療效監(jiān)測(cè)中MIF、MMP-3和

9、TGF-β1是有希望的候選細(xì)胞因子和生物標(biāo)志物之一。
　　 目的:探討應(yīng)用重組人II型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白(依那西普，etanercept)治療.AS和USpA患者時(shí)血清MIF、MMP-3、TGF-β1水平的變化和意義。
　　 方法:
　　 1.36例活動(dòng)期AS和30例活動(dòng)期USpA患者分別隨機(jī)分為依那西普組和安慰劑組；
　　 2.AS患者中，依那西普組皮下注射25 mg依那西普，每周兩次，共6

10、周；安慰劑組接受6周安慰劑皮下注射，每周兩次；
　　 3.USpA患者中，前6周依那西普組和安慰劑組治療方法同AS患者，后6周USpA依那西普組和安慰劑組患者共同再接受與前劑量相同的依那西普治療；
　　 4.30例健康志愿者不作處理；
　　 5.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)健康志愿者和AS、USpA患者在第0周、第6周、第12周血清MIF、MMP-3、TGFβ1水平，并與病程、ESR、CRP、BASDA

11、I、BASFI、PGA、總體背痛、壓痛關(guān)節(jié)數(shù)等臨床指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析。
　　 結(jié)論:
　　 1.依那西普可下調(diào)AS患者血清MIF水平，后者可作為反映AS疾病活動(dòng)性及監(jiān)測(cè)生物制劑療效的潛在指標(biāo)之一。
　　 2.依那西普可下調(diào)AS和USpA患者血清MMP-3水平，血清MMP-3水平可作為評(píng)價(jià)AS和USpA疾病活動(dòng)性和監(jiān)測(cè)依那西普療效有價(jià)值的生物學(xué)指標(biāo)之。
　　 3.依那西普可下調(diào)AS和USpA患者血清TGF-β