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1、目的:研究三甲基氯化錫(Trimethyltin Chloride,TMT)對(duì)腎氫鉀ATP酶(H<'+>-K<'+>+ATPase,HKA)活性的抑制作用,闡明TMT中毒致低鉀血癥的確切機(jī)制。 方法: (1)斷頭處死大鼠,取。腎,制備腎組織勻漿(10%)。按酶活性測(cè)定試劑盒的方法,觀察腎組織勻漿濃度,反應(yīng)時(shí)間,哇巴因及sch28080對(duì)酶活性的影響,確定最佳實(shí)驗(yàn)條件。在反應(yīng)體系中,加入0,5,25,125和625μM的T
2、MT,測(cè)定腎HKA的活性,用腎臟HKA酶特異抑制劑Sch-28080作為質(zhì)控。 (2)取SD大鼠24只,隨機(jī)分為4組,分別腹腔注射TMT 0、10、21.5、46.4mg/kg 1小時(shí)后經(jīng)心臟采集動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治?;其后斷頭處死動(dòng)物,取血漿測(cè)定K<'+>、Na<'+>、Cl<'->、GLU、CK、CK-MB、LDH、HBDH、AST、AKT;取一側(cè)腎臟測(cè)定HK和鈉鉀ATP酶(NKA);另一側(cè)腎臟進(jìn)行HKA免疫熒光原位觀察和組織病
3、理學(xué)觀察。 (3)取SD大鼠36只,隨機(jī)分為6個(gè)組,其中3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,分別經(jīng)腹腔注射TMT(10 mg/kg),另3組為對(duì)照組,分別給予生理鹽水(10ml/kg)。分別于染毒后第0、2、5天進(jìn)行24小時(shí)代謝實(shí)驗(yàn),收集24AJ、時(shí)尿液,檢測(cè)尿中K<'+>、Na<'+>、Cl<'->、GLU、Cr;其后按(2)的方法處理動(dòng)物,用多元相關(guān)分析法分析血中K<'+>、pH、尿K<'+>、pH與腎HKA活性的相關(guān)關(guān)系影響。 (4)取S
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