結扎冠狀動脈誘發(fā)TNF-α和P物質在大鼠心肌組織、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓的表達及藥物干預效應的研究.pdf

1、目的：觀察結扎大鼠冠狀動脈不同時點心肌、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓內(nèi)TNF-α和SP的表達變化及嗎啡、曲馬多、酚妥拉明、艾司洛爾、阿托品預先給藥的干預效應，探討(1)TNF-α和SP在心肌缺血傷害性刺激誘發(fā)機體神經(jīng)源性反應機制中的作用及機理；(2)局部心肌急性缺血誘發(fā)整體心肌損傷的機制；(3)痛覺干預在缺血心肌保護中的作用及機制。 方法：第一部分：TNF-α和SP的表達變化實驗選用雄性SD大鼠隨機分為三組：(1)動物對照組(Control

2、group，C組)，麻醉后直接取材；(2)手術對照組(Shamgroup，S組)，只開胸不結扎冠脈；(3)結扎冠狀動脈組(Coronaryarteryocclusiongroup，CAO組)，單純扎閉冠狀動脈左前降支。其中，Sham組和CAO組又分為八個時點的亞組：0.5h組、1h組、3h組、6h組、1day組、2day組、3day組、7day組。采用免疫組化和ELISA技術觀察結扎大鼠冠狀動脈不同時點心肌、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓內(nèi)TNF-α

3、和SP的表達變化； 第二部分：TNF-a和SP的表達變化的干預研究根據(jù)第一部分實驗結果，分別選取CAO后TNF-α和SP表達最強的時點進行藥物干預研究。采用雄性SD大鼠隨機分為八組：(1)動物對照組(Controlgroup，C組)；(2)手術對照組(Shamgroup，S組)；(3)結扎冠狀動脈組(Coronaryarteryocclusiongroup，CAO組)；(4)嗎啡預處理組(Morphinegroup，M組)；(5

4、)曲馬多預處理組(Tramadolgroup，T組)；(6)酚妥拉明預處理組(Rigitinegroup，R組)；(7)艾司洛爾預處理組(Esmololgroup，E組)；(8)阿托品預處理組(Atropinegroup，A組)。各藥物干預組分別在結扎左冠狀動脈前15min經(jīng)尾靜脈給予嗎啡1.25mg.kg-1、曲馬多12.5mg.kg-1、酚妥拉明0.4mg.kg-1、艾司洛爾3.0mg.kg-1、阿托品1.0mg.kg-1。采用免疫

5、組化、ELISA和RealTimeRT-PCR技術觀察各藥物的干預效應。 結果：(1)CAO后大鼠心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓TNF-α水平較對照組顯著升高，心肌TNF-α在CAO1h達高峰，背根神經(jīng)節(jié)及脊髓TNF-α在CAO0.5h達高峰；血運阻斷區(qū)心肌TNF-α水平較非血運阻斷區(qū)心肌顯著升高；背側和腹側脊髓TNF-α水平比較無顯著性差異；各藥物干預組TNF-α水平明顯低于CAO組，各藥物干預組之間TNF-α水平無顯著性差異。(2)

6、CAO后大鼠心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓SP水平較對照組顯著升高，心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓SP在CAO3h達高峰；血運阻斷區(qū)心肌SP水平較非血運阻斷區(qū)心肌顯著升高；背側脊髓SP水平較腹側脊髓顯著升高；各藥物干預組SP水平明顯低于CAO組，各藥物干預組之間SP水平無顯著性差異。(3)在心肌組織和背根神經(jīng)節(jié)，CAO組TNF-αmRNA和SPmRNA的表達水平均較對照組顯著升高(P＜0.05)，各藥物干預組明顯低于CAO組(P＜0.05)，各藥物干預

7、組之間無顯著性差異。與蛋白水平變化一致；但在脊髓，CAO組TNF-αmRNA和SPmRNA的表達水平與對照組、各藥物干預組比較無顯著性差異。 結論：(1)結扎冠狀動脈可誘發(fā)大鼠心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓TNF-α和SP水平明顯升高，提示：急性心肌缺血作為一種傷害性刺激可能誘發(fā)、激活了機體神經(jīng)源性反應機制；TNF-α和SP可能在這種神經(jīng)源性機制中發(fā)揮了作用；神經(jīng)源性機制可能參與了急性心肌缺血傷害性刺激誘發(fā)的心肌損傷及其調(diào)制的病理學過程