急性心肌缺血誘發(fā)大鼠肺組織TNF-α的表達變化及藥物干預研究.pdf

1、目的：觀察結扎大鼠冠狀動脈左前降支不同時點，腫瘤壞死因子-alpha(TNF-α)在大鼠腫組織內的表達變化及硬膜外嗎啡、羅哌卡因痛覺干預對該變化的影響，探討傷害性刺激誘發(fā)肺內神經源性機制的作用及痛覺干預在缺血心肌保護中的作用及機制，探討多器官損傷及保護機制，對臨床治療提供參考信息。 方法： 第一部分：TNF-α的表達變化實驗選用雄性SD大鼠隨機分為兩組：(1) 假手術組(Sham group，S組)，只開胸暴露心臟不結扎

2、冠脈；(2) 結扎冠狀動脈組(Cororlary arteryocclusion group，CAO組)，單純扎閉冠狀動脈左前降支。其中，Sham組和CAO組又分為四個時點的亞組：0.5h組、1h組、3h組、6h組，每組大鼠均為6只。1h組、3h組、6h組分別采用免疫組化(immunohistochemistry，IHC)、酶聯(lián)免疫吸附技術(enzyme-linked immunosorberlt assay，ELISA)；3h組采用原

3、位雜交(in situhybridization，ISH)、0.5h組采用實時熒光定量反轉錄聚合酶鏈反應(real timereverse trancriptatjon polymerase chain reaction，Real Time RT-PCR)從蛋白和mRNA水平觀察并分析結扎大鼠冠狀動脈不同時點肺組織內TNF-α的表達變化情況。 第二部分：硬膜外預先給藥后TNF-α的表達變化的研究采用雄性SD大鼠隨機分為四組：(1

4、)假手術組(Sham group，S組)：(2)結扎冠狀動脈組(Coronary artery occlusiongroup，CAO組)；(3) 硬膜外嗎啡預處理組(Epidural Morphine group，E-M組)，在結扎左冠狀動脈前 15min經硬膜外給予嗎啡60μg．kg-1。(4) 硬膜外羅哌卡因預處理組(Epidural Ropivacaine group，R-M組)，在結扎左冠狀動脈前15min經硬膜外給予1％羅哌卡

5、因15μl。同第一部分分別采用IHC、ELISA和Real Time RT-PCR從蛋白和mRNA水平對比分析藥物的干預效應。 結果：(1) 結扎冠狀動脈左前降支后大鼠腫組織內TNF-α水平較S組顯著升高(P<0.01)，肺組織內TNF-α的表達在CA03h達高峰(P<0.01)；(2) 硬膜外嗎啡預處理組TNF-α水平明顯低于CAO組(P<0.01)(3) 硬膜外羅哌卡兇預處理組TNF-α水平明顯低于CAO組(P<0.01)結